肌红蛋白(Human Myoglobin, hMb)是国际公认的早期诊断急性心肌梗塞(AMI)的生化标志物之一,由于天然的人心肌肌红蛋白极难获取,分离纯化复杂困难,限制了它的研究和应用,基于以上目的构建稳定、高效表达重组人心肌肌红蛋白基因工程菌株,为临床检测心肌损伤提供诊断试剂材料。同时进一步研究了适配子生物传感器,四环素适配子生物传感器可以特异性结合四环素类抗生素,检测速度快,因此可以用于四环素类抗生素的特异性检测。本实验根据Mb的基因序列设计合成引物,采用聚合酶链式反应(PCR)方法从人心肌cDNA文库中克隆出编码Mb的cDNA片段,将其插入到表达载体(pET-22b)中,转化到大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达的目的蛋白,采用Ni-NTA树脂纯化目的蛋白,进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE).实验结果表明：成功构建得到稳定、高效表达重组人心肌红蛋白的基因工程菌,并在大肠埃希菌中高效表达,蛋白表达量约为细菌总蛋白的5%,经镍柱(Ni-NTA树脂)纯化得到目的蛋白Mb。在适配子生物传感器的研究中对玻碳电极进行硅烷化,即在玻碳电极表面导入-NH2。利用适配子自身带的磷酸基团与氨基进行共价结合,将四环素适配子固定于电极表面。当构建的四环素适配子生物传感器对标本中的抗生素进行检测时,循环伏安曲线给出的电化学信号可以反应出标本中抗生素的含量。实验结果表明适配子生物传感器的最低检测限为1μg/L,检测时间为5min。综上所述,成功构建稳定、高效表达重组人心肌肌红蛋白的基因工程菌以及适配子生物传感器的研究为建立急性心肌梗死早期诊断和四环素类抗生素的检测奠定了基础。