棉花短纤维突变体(Ligon)及其野生纤维的比较蛋白质组学研究和GhTCP基因的功能分析

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:LUOLIJIAN88
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
棉花纤维是世界上最重要的天然纺织纤维,在纺织工业中具有重要的地位。棉纤维是胚珠表皮细胞分化发育而成的单细胞种子毛,其发育过程可分成四个独立但又相互重叠的时期:起始期、伸长期、次生壁沉积期和成熟期。棉纤维是最长的植物细胞之一,在伸长期以极快的速度进行同步化延伸,被认为是研究植物细胞极性伸长的理想模式体系。   规模化分离鉴定棉纤维伸长相关基因和蛋白不仅能为阐明植物细胞伸长的分子机理提供依据,也可为通过基因操作方法定向改良纤维长度提供目标基因。在本论文第一部分研究工作中,我们利用双向电泳技术,通过系统比较棉花短纤维突变体Ligon-lintless(Li1)及其野生型纤维的蛋白质组,结合本地化EST数据库辅助的质谱鉴定分析,从开花后12天突变体纤维中鉴定了81个差异表达蛋白,其中54个蛋白的表达量下调,27个蛋白的表达量上调。数据库分析表明下调蛋白主要属于细胞骨架、蛋白折叠和稳定、细胞核与细胞质间运输、信号转导以及囊泡介导的运输等功能组,上调的蛋白主要归为胁迫应答、内质网UPR(unfolded protein response)响应及代谢/能量功能组。由于在下调蛋白中细胞骨架相关蛋白及分子伴侣占比例较大并且其表达受到明显抑制,我们对突变体中与这些蛋白功能相关的细胞学影响进行了深入分析。结果表明在突变体纤维中微丝骨架排列高度异常、微管骨架排布明显改变、囊泡运输受阻;用分子伴侣HSP90特异性抑制剂radicicol处理体外培养野生型棉花纤维后,其细胞伸长受到明显抑制;进一步证明细胞骨架及分子伴侣蛋白家族在纤维伸长中具有重要功能。这些蛋白质组水平加之细胞学水平的分析结果增进了我们对棉纤维伸长相关分子机制的了解。   在本论文另一部分研究工作中,我们通过筛选纤维和棉花叶抑制性扣除杂交(SSH)cDNA文库,得到1个编码TCP(TB1,CYC,和PCFs)结构域的基因片段,进一步数据库搜索得到几条同源的EST序列,通过RACE技术获得各自的全长cDNA,相应基因分别命名为GhTCP1、GhTCP2和GhTCP3。RT-PCR分析表明这三个基因均在纤维快速伸长期特异表达。我们选取GhTCP1基因进行了深入功能分析。随机结合位点实验及EMSA实验表明GhTCP1的特异性结合位点序列同其它TCP蛋白相似,表明该蛋白属于TCP转录因子家族成员。亚细胞定位实验证实GhTCP1蛋白主要定位于细胞核。在拟南芥中过量表达GhTCP1基因导致植株发育异常,表现为植株矮小、生长缓慢、细胞伸长受阻。转基因植株萼片表皮毛数目增多,叶、茎及萼片上的表皮毛长度增加。表明GhTCP1能影响转基因植物细胞的伸长和表皮毛的生长发育。这些实验结果表明在棉花中GhTCP1可能作为一个重要的转录因子参与控制棉纤维细胞的分化和伸长。
其他文献
随着人类活动范围不断扩大,以及对野生动物的捕猎和烹食,一些在自然界长期存在的病原体突破物种屏障传播给人和家畜,造成新发传染病的概率大大增加.rn尽管现在对于新型冠状病
期刊
相变存储器(Phase Change Random Access Memory,PCRAM)因读写速度快、与CMOS(complementary-metal-oxide-semiconductor,CMOS)兼容、可微缩性好等优点被认为是最有前景的新型
集成电路技术的飞速发展,CMOS技术的微缩化发展已使特征尺寸进入到22nm及以下的纳米节点。技术节点的进一步缩小,增强的短沟道效应和较高的功耗等问题,使传统CMOS技术将遇到前所
目前光通信系统中的光子交换方式已经限制了光纤通信优势的发挥,出现了所谓的“电子瓶颈”问题,而全光网络将突破电交换的瓶颈成为下一代网络的核心技术,引起了广泛的兴趣。  
针对杉木化感物质种类的争论,我们以生测活性做导向,对杉木人工林土壤中毒性化感物质进行了分离,并通过质谱、核磁共振等仪器对化感物质的化学结构进行了鉴定,然后研究了其活性和
细胞型朊蛋白(PrPc)是哺乳动物体内高度保守且广泛表达的一种带有糖基磷脂酰肌醇锚(GPI-anchor)以及两个Asn(N)连糖基修饰的糖蛋白,该蛋白通过其羧基端的GPI-anchor锚定位于细
随着通信等行业的发展,从2G时代的GSM系统采用200KHZ的载波带宽到3G时代的CDMA系统采用的1.25MHZ和WCDMA系统采用的5MHZ载波带宽,信号带宽的不断增大,对于宽带信号,不仅带来了大
2019年,我养了黄牛、水牛20头,波尔山羊20只,散养土鸡400只,新买了一台拖拉机,种了20亩田,算下来今年收入将会超过10万元.这要是放在以前,我想都不敢想.这都要感谢党和政府的
期刊
以金属材料制成的传统冲击片雷管点火系统具有很强的抗电磁干扰、抗射频干扰能力和可靠性高等优点。半导体桥火工品与冲击片雷管相比,具有以下优势:高集成度,且能与数字逻辑电
串行RapidIO(SRIO)互连是近年来发展迅速的高速传输技术,也是嵌入式系统互连的国际标准。这项技术支持芯片级和板级的互连,具有事务类型丰富、拓扑结构灵活、数据传输可靠、带