糖链,作为重要的信息分子,介导着许多重要的生物学过程,包括细胞间识别、免疫反应、细胞粘附,细胞生长、细胞分化等等。与糖链的广泛功能密切相关的是同样多样化的与糖链相结合的蛋白,即糖结合蛋白。糖结合蛋白的研究对于真正地理解糖链-蛋白的相互作用至关重要。本课题利用实验室自主建立的糖芯片技术和糖-磁性微粒复合物分离技术对血清和唾液中的糖结合蛋白进行了研究,实验分为两部分：(1)利用糖芯片和糖-磁性微粒复合物分离技术对肝癌患者和健康志愿者血清中的糖结合蛋白进行筛选、分离与鉴定,并通过emPAI (?)(?)标记定量方法确定了样品中糖结合蛋白的表达水平情况,以期寻找可能的糖结合蛋白类的潜在肝癌生物标志物。首先,利用含有16种糖链的糖芯片对于血清样品中糖结合蛋白进行初步筛选;然后根据芯片结果,选择了三种糖链(fucose、Neu5Ac(?)(?) lactose)对于相应的糖结合蛋白进行了分离；最后,利用LC-MS/MS对分离的糖结合蛋白进行鉴定,并通过emPAI非标记定量方法进行不同组样品间的定量比较。质谱鉴定蛋白结果：岩藻糖(fucose)结合蛋白,在肝癌患者血清中47种,健康志愿者血清中鉴定蛋白50种,两组血清中同时鉴定到27种,其中,共同鉴定的蛋白中9种在肝癌患者血清中表达降低,3种在肝癌患者血清中表达升高；N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)结合蛋白,在肝癌患者血清中45种,健康志愿者血清中鉴定蛋白78种,两组血清中同时鉴定到29种,其中,共同鉴定的蛋白中22种在肝癌患者血清中表达降低,2种在肝癌患者血清中表达升高；乳糖(lactose)结合蛋白,在肝癌患者血清中36种,健康志愿者血清中鉴定到30种,两组血清中同时鉴定到15种,其中,共同鉴定的蛋白中4种在肝癌患者血清中表达降低,3种在肝癌患者血清中表达升高。本实验对于肝癌患者和健康志愿者血清中的糖结合蛋白分布、含量和功能进行了分析,对于进一步理解糖结合蛋白在机体中的功能提供了重要信息,也为发现新的肝癌生物标志物提供了新的思路。(2)利用包含有40种糖链的糖芯片,对于儿童、成年和老年三个年龄段的男性和女性的唾液分别进行了分析。通过对比不同组样品间的糖芯片结果,对不同年龄段男性和女性中的糖结合蛋白在分布特点进行初步研究。从芯片结果可以看出,唾液中含有复杂的蛋白质组分,在分析中糖链根据其末端结构的特点被分成了不同的类别,结果发现相同类别的糖链间其糖结合蛋白具有相似的分布特点,说明了末端糖链在糖链-蛋白识别过程中的重要作用。同时我们发现,相比性别,不同年龄段实验组的唾液中的糖结合蛋白的差异更为明显。本研究对唾液中的糖蛋白情况进行了总体的分析,揭示了不同性别和年龄人群唾液中的糖结合蛋白分布的总体趋势。但由于唾液组分的复杂性和糖芯片技术本身的局限,唾液中糖结合蛋白的具体信息如蛋白组分、功能等,还需要进一步研究。