鸭坦布苏病毒病是由鸭坦布苏病毒（Duck Tembusu virus,DTMUV）引起的以产蛋率大幅下降、生长发育迟缓、卵巢出血为主要特征的传染病,给养殖业造成重大损失。DTMUV越早被诊断,养殖户的损失越小,因此建立特异性强、灵敏高的DTMUV早期检测方法是预防和控制该病的关键。NS1蛋白是DTMUV高度保守的非结构蛋白,由352个氨基酸残基组成,分子量大小为40k Da。研究报道在DTMUV感染初期即可检测到NS1蛋白,提示其与病毒的早期感染相关。本研究应用针对于NS1蛋白的单克隆抗体,建立快速胶体金试纸条,为鸭坦布苏病毒病的早期检测提供技术支持。首先,选用本实验室制备的抗坦布苏病毒NS1蛋白单克隆抗体,用Western blot和IFA检测其反应原性及特异性。确定良好的反应原性及特异性后,将其作与胶体金溶液结合形成金标抗体。包被抗体则选用本实验室已制备好的鼠抗NS1蛋白多克隆抗体（检测线）和羊抗鼠Ig G（质控线）,探究构建双抗体夹心免疫层析试纸条的条件。结果表明,NS1单抗-胶体金复合物溶液的最佳结合p H为8.1,最适浓度为7.5μg/m L。根据抗体在膜上释放速度及释放完全程度,选用VL98金标垫和Sartorius CN95膜。NS1多克隆抗体稀释比为1:5,二抗Ig G浓度在1.0 mg/m L时包被于NC膜上,C/T线条带清晰可见。其次,对初步构建的试纸条分别从敏感性,特异性,稳定性和重复性四个方面进行分析,探究研制的试纸条在临床应用的可行性,结果表明该试纸条可在3～10 min内特异性检测坦布苏病毒,最低检测稀释度为1:125,且不与新城疫病毒、禽白血病毒、鸭瘟病毒、呼肠孤病毒发生交叉反应。本论文建立了快速检测坦布苏病毒的胶体金免疫层析试纸条的方法,验证了所选抗坦布苏病毒NS1蛋白单克隆抗体具有良好的反应原性和特异性,并在此基础上研制出了鸭坦布苏病毒NS1单克隆抗体胶体金试纸条。该试纸条操作简便、特异性强,敏感性高,重复性好,可用于DTMUV的临床快速诊断,为防治该病提供了技术支持。