目的： Nucleophosmin/B23(Nucleophosmin，NPM,numatrin,N038)是一种多功能的核仁磷酸化蛋白，在细胞生长和增殖中发挥重要的作用。过去研究还表明NPM可能是癌基因，在一些肿瘤中呈过表达。乳腺癌是一种细胞生长活跃且病死率高的恶性肿瘤。本研究拟用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹(Western Blot)及免疫组织化学等技术，通过比较PCNA和Ki67表达，探讨NPM在乳腺癌组织中的表达及其临床病理意义。 材料和方法： 收集中山大学肿瘤防治中心手术切除的4对新鲜乳腺癌组织及对应的癌旁乳腺组织，4例乳腺纤维腺瘤组织和4例纤维囊性乳腺病组织，术后立即储存于-80℃冰箱保存，用于抽提RNA及蛋白；另收集中山大学肿瘤防治中心有病理档案资料的乳腺手术病例：145例乳腺癌及癌旁乳腺组织、46例乳腺纤维腺瘤、42例纤维囊性乳腺病组织，用于免疫组化及临床病理统计。RT-PCR检测NPMmRNA在乳腺癌组织及癌旁乳腺组织、乳腺纤维腺瘤组织和纤维囊性乳腺病组织中的表达水平。Western Blot检测NPM蛋白和PCNA蛋白在乳腺癌组织及相应的癌旁组织、乳腺纤维腺瘤组织和纤维囊性乳腺病组织中的表达水平。免疫组织化学法检测NPM蛋白、PCNA蛋白和Ki67蛋白在乳腺癌组织及相应的癌旁组织、乳腺纤维腺瘤组织和纤维囊性乳腺病组织中的表达水平及其与临床病理特征(患者年龄、肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移情况、病理分级、生存期、核分裂数、雌激素受体及孕激素受体表达)的关系。每例数1000个细胞，分为4种染色强度，即：-、+、++、+++。分别计算每种强度的百分比再转换成Ridit值代表其表达水平。采用SPSS13.0统计软件包进行数据处理。 结果： 1、NPM在乳腺癌组织中的高表达 1.1 逆转录PCR结果显示：NPM mRNA在乳腺癌组织中的表达明显高于对应的癌旁乳腺组织、乳腺纤维腺瘤组织和纤维囊性乳腺病组织。NPM mRNA在乳腺癌组织中的表达强度分别是对应的癌旁乳腺组织、乳腺纤维腺瘤组织和纤维囊性乳腺病组织的2.25、4.82及4.15倍． 1.2免疫印迹结果显示：NPM蛋白在乳腺癌组织中的表达明显高于在乳腺纤维腺瘤组织和纤维囊性乳腺病组织中的表达水平，但是NPM蛋白在乳腺癌组织和相应的癌旁组织表达没有差异。 1.3免疫组织化学结果显示：NPM蛋白在乳腺癌组织中的表达明显高于在乳腺纤维腺瘤组织和纤维囊性乳腺病组织中的表达水平，但是NPM蛋白在乳腺癌组织和相应的癌旁组织表达没有差异。t检验表明，NPM蛋白在乳腺癌组织中的表达强度与NPM蛋白在乳腺纤维腺瘤和纤维囊性乳腺病组织的表达强度有明显差异(P＜0.05)，而NPM蛋白在乳腺癌组织和相应的癌旁组织表达差异无统计学意义(P＞0.05)。 2、NPM、PCNA和Ki67蛋白在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系 2.1 免疫印迹结果显示：NPM蛋白与PCNA蛋白在乳腺癌组织中均呈高表达。NPM蛋白在乳腺癌组织中的表达明显高于在乳腺纤维腺瘤组织和纤维囊性乳腺病组织中的表达水平，但是NPM在乳腺癌组织和相应的癌旁组织表达没有差异；PCNA蛋白在乳腺癌组织中的表达明显高于在相应的癌旁组织、乳腺纤维腺瘤组织和纤维囊性乳腺病组织中的表达。 2.2免疫组织化学结果显示：NPM蛋白在乳腺癌组织中的表达明显高于在乳腺纤维腺瘤组织和纤维囊性乳腺病组织中的表达水平，但是NPM在乳腺癌组织和相应的癌旁组织表达没有差异。PCNA蛋白和Ki67蛋白在乳腺癌组织中的表达明显高于在相应的癌旁组织、乳腺纤维腺瘤组织和纤维囊性乳腺病组织中的表达水平。统计分析表明PCNA和Ki67在乳腺癌组织中的表达强度分别高于它们在相应癌旁、乳腺纤维腺瘤组织和纤维囊性乳腺病组织中的表达强度，差异有统计学意义(P＜0.05)。进一步分析表明NPM与PCNA和Ki67在四组乳腺病变中的表达强度具有相互关联性，相关系数分别为0.340(P=0.000)和0.361(P=0.000)。 2.3 NPM蛋白、PCNA蛋白和Ki67蛋白表达与乳腺癌临床病理特征的关系。NPM表达强度与乳腺癌细胞核分裂数、组织学分级和孕激素受体表达的差异有统计学意义(P＜0.05)；而与年龄、肿瘤大小、有无淋巴结转移、临床分期、生存期以及雌激素受体等临床病理参数比较差异无统计学意义(P＞0.05)。PCNA蛋白和Ki67蛋白的表达强度与乳腺癌细胞核分裂数差异有统计学意义(P＜0.05)；而与年龄、肿瘤大小、有无淋巴结转移、临床分期、组织学分级、生存期、雌激素受体以及孕激素受体之间的关系均未见统计学意义(P＞0.05)。NPM蛋白和PCNA蛋白表达强度与患者的预后没有关联，而Ki67蛋白表达强度与患者的预后有关联(P＜0.05)。 结论： 1、Nucleophosmin/B23在乳腺癌组织中呈高表达，提示其在乳腺癌的发生、发展中可能发挥重要作用。 2、Nucleophosmin/B23、PCNA和Ki67都是乳腺癌的增殖指标，但三者比较，Ki67是更优越的增殖标记。