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目的：表皮生长因子受体(EGFR)已被确定为许多类型肿瘤的一个共同特征。一些临床研究结果表明,宫颈癌细胞膜EGFR的表达与预后及对放疗反应的相关性仍然是有争议的或不确定的。有研究显示,EGF和放射线可诱导EGFR 654位点苏氨酸磷酸化及其核转位,活化DNA-PKcs介导DNA损伤的非同源末端连接(NHEJ)修复,从而产生放射抵抗。我们前期临床研究证实,pEGFRThr654的高表达是宫颈癌一个独立的不良预后指标。同步放化疗是局部晚期宫颈癌的主要治疗手段。pEGFRThr654是否导致宫颈癌放化疗抵抗和影响患者的预后值得研究。抑制pEGFRThr654介导的DNA-PKcs活化可能有助于改善局部晚期宫颈癌的治疗反应和预后。但EGFR抑制剂能否用于宫颈癌的治疗一直是争论的焦点。因此,本研究旨在探讨放射对宫颈癌细胞EGFR核转位的影响,探索EGFR抑制剂西妥西单抗／吉非替尼对宫颈癌EGFR、pEGFRThr654核转位的作用,以期探寻宫颈癌靶向EGFR治疗的潜在性,为宫颈癌的靶向EGFR核转位同步放化疗提供理论基础。方法:CaSki、C-33A和A-431细胞采用6MV X射线进行单次照射4Gy,于照射后10、20和40min分离提取细胞质、细胞核蛋白,Western blot测定各细胞株EGFR表达水平。选择核EGFR高表达细胞株进一步单独照射及分别联合西妥昔单抗／吉非替尼处理,Western blot测定细胞质胞核EGFR和pEGFRThr654、DNA-PKcs和pDNA-PKcsThr2609的蛋白表达水平。采用克隆形成法研究西妥昔单抗／吉非替尼是否增加宫颈癌细胞的放射敏感性,用单击多靶数学模型[SF=1-(1-e-D/D0)N]和线性二次方程模型[SF=e∧(-αD-βD2)]计算出D0、Dq、SF2、α/β和SER等相关放射生物学参数,并拟合不同药物组的剂量-生存曲线。采用SPSS16.0软件进行统计学分析。结果：4Gy照射后,CaSki、C-33A和A-431细胞核EGFR表达水平随时间增加而增加,其中CaSki细胞EGFR核转位显著,后续实验选择CaSki细胞进一步研究。照射后40minCaSki细胞核内EGFR和pEGFRThr654, DNA-PKcs和pDNA-PKcsThr2609的表达水平均显著升高(P<0.05)。单独使用吉非替尼诱导核内EGFR (P=0.011)和pDNA-PKcsThr2609表达上调(P=0.022),与对照组比较分别增加了60%、32%,但不影响pEGFRThr654(P=0.971)和DNA-PK(P=0.881)表达；辐射联合吉非替尼预处理,pDNA-PKcsThr2609表达下调(P=0.001),与单独照射比较降低了41%,但核EGFR、pEGFRThr654和DNA-PK降低水平无统计学意义(P=0.347、0.971和0.227),放射生物学相关参数D0值为2.396Gy、Dq值为0.860Gy、SF2值为50.94%、α/β值为11.3456Gy、SER值为1.41。单独使用西妥昔单抗诱导核内EGFR(P=0.033)和pDNA-PKcsThr2609 (P=0.012)表达上调,与对照组比较分别增加了40%和24%,但不影响pEGFRThr654 (P=0.887)和DNA-PK(P=0.275)表达；放射联合西妥昔单抗预处理,核EGFR和pEGFRThr654、DNA-PKcs和pDNA-PKcsThr2609表达均下调(P值均<0.05),与单独照射比较分别降低了：29%、31%、16%和66%,放射生物学参数D0值为1.572Gy、Dq值为0.385Gy、SF2值为31.70%,α/β值为49.3735、SER值为2.34。方差分析显示,Ca Ski细胞经吉非替尼预处理后D0、Dq无明显变化(P>0.05),而使用西妥昔单抗处理后放射敏感性增高(P<0.05)。结论：辐射诱导宫颈癌EGFR核转位,pEGFRThr654磷酸化激活pDNA-PKcsThr2609,可能介导宫颈癌放疗抵抗。西妥昔单抗／吉非替尼对宫颈鳞癌EGFR、pEGFRThr2609,的内源性表达无作用。但西妥昔单抗能减少辐射诱导pEGFRThr654核转位及DNA非同源末端连接修复的关键激酶pDNA-PKcsThr2609,增加放疗敏感性,放疗联合西妥昔单抗可能成为宫颈癌治疗的新模式。