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研究背景：克隆性染色体异常是诊断骨髓增生异常综合征(MDS)的主要依据之一。同常规细胞遗传学显带分析(CC)不同,荧光原位杂交技术(FISH)不需要细胞培养,利用位点特异性基因探针可以检测间期细胞的克隆性染色体改变,并可以检测出10-20%左右核型正常的MDS的异常克隆。应用FISH技术,可以提高MDS患者染色体异常检出率,为诊断和治疗提供帮助。目的：本研究对MDS患者进行常规细胞遗传学显带分析(CC)和FISH检测,建立在MDS诊断过程中的规范化的FISH检测平台；比较FISH与常规细胞遗传学方法在检测MDS染色体异常克隆中的差异,探讨FISH在MDS诊断中的地位。方法：对符合维也纳最低诊断标准的MDS患者进行常规细胞遗传学显带分析(CC)和FISH检测,并搜集患者一般临床资料。结果：1.成功建立包括-5/5q-,+8,-7/7q-,20q-,-Y探针组合的FISH诊断MDS的检测平台,成功率100%。2.北京协和医院确诊的83例MDS中,两种方法总的染色体异常检出率42.2%,其中CC法检出率30.1%,FISH阳性率33.7%.两种方法的符合率为76.1%。3.FISH法较CC法在FAB亚型RA组患者检出率更高(30.7%VS24.6%,P=0.000),而在FAB其他组及WHO分型各亚组染色体异常检出率类似。4.在IPSS分组中,FISH法能提高中危1组的检出率(29.6%VS10%,P=0.049),而对中危2患者CC法检出率更高(81.2%VS62.5%,P=0.036)。5.CC法检测正常或失败患者中,有11例(19%)患者FISH法检测阳性,其FAB分型以RA患者为主9例(81.8%)；IPSS分组以中危1为主10例(90.9%)。6.用FISH法与CC法分别进行IPSS分组,发现用两种方法评价IPSS吻合率为86.7%。单纯用CC法结果进行IPSS分组将导致3例患者(3.6%)危险分级下滑,而单纯FISH法结果进行IPSS分组将导致8例患者(9.6%)危险分级下滑。7.两种方法检出的染色体异常35例(42.2%),复杂核型13例(15.7%),单一异常核型22例(26.5%)。最常见的染色体异常为+8,共9例,占10.8%,其次为7号染色体的异常,共7例,占8.4%。结论：成功建立FISH技术在骨髓增生异常综合征染色体异常的检测平台,方法稳定、灵敏、快速。FISH技术联合CC技术,可提高骨髓增生异常综合征患者染色体异常的检出率。相比CC技术,FISH技术可以提高FAB分型RA组与IPSS分组中危1患者染色体异常的检出率。FISH技术因包含探针有限,不能完全替代CC法在骨髓增生异常综合征检测中的作用,但可以相互补充。研究背景：黑色素瘤优先表达基因(Preferentially Expressed Antigen of Melanoma)是一种肿瘤相关抗原,广泛在实体瘤以及急慢性白血病中高表达,可用来作为微小残留病MRD的监测,并用来预测疗效。目前国内外尚没有研究其在MDS中的表达情况。目的：本研究检测PRAME基因在MDS中的表达情况,探讨PRAME基因表达在MDS诊断和预后判断的意义。方法：采用实时定量PCR的方法检测66例符合维也纳最低标准的MDS患者中PRAME基因的表达情况,以13例非造血系统肿瘤患者作为阴性对照,以K562细胞作为阳性对照。结果：1.MDS患者PRAME基因相对表达量的中位数为1.6×10-4(0-8.0),明显高于非造血系统肿瘤患者5.3×10-6(0-2.8×10-1),p<0.001。13例(20%)的MDS患者PRAME基因表达阳性,其中RA组阳性患者8例,阳性率17%,RAS组患者1例,阳性率14%,RAEB组患者4例,阳性率33%。2.FAB分型、WHO分型、以及IPSS各亚组患者PRAME阳性率及表达水平无显著差异。3PRAME基因相对表达量与骨髓中原粒细胞比例呈正相关,r=0.244,P=0.034。4骨髓形态中出现小巨核细胞的患者PRAME基因表达的阳性率更高,P=0.030.5.两例随诊患者PRAME基因的表达量变化与临床病情转化相一致。结论：1.MDS患者的PRAME基因的相对表达量较非造血系统肿瘤患者增高。2.MDS患者FAB分型、WHO分型、IPSS分组,各亚组PRAME的表达未达显著差异。3.PRAME基因的表达水平与部分MDS患者临床病情变化密切相关,有望成为监测骨髓增生异常综合征MRD的有效指标。