【摘 要】
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本文基于实时荧光定量PCR技术,分别建立了糖尿病肾病、雄激素代谢过程以及乳腺癌部分相关基因表达的定量检测方法,并分别应用于糖尿病肾病中西医分型、前列腺癌去势手术的雄
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本文基于实时荧光定量PCR技术,分别建立了糖尿病肾病、雄激素代谢过程以及乳腺癌部分相关基因表达的定量检测方法,并分别应用于糖尿病肾病中西医分型、前列腺癌去势手术的雄激素代谢以及乳腺癌诊断基因的研究.主要研究成果:
1.运用实时荧光定量PCR技术,对糖尿病肾病患者的AR、AGT、CDKAL1基因的表达进行测定,并分别比较了西医各个分期和中医各个分期之间基因表达差异,阐述了这些基因表达变化对病程的关系.结果表明AR、AGT、CDKAL1基因的表达量都随病情的加深而增加,三者均可作为西医诊断II型糖尿病、DN以及DNV期的标志基因,也可作为中医诊断DN的标志基因,其中AGT、CDKAL1基因还可以作为中医诊断DN阴阳两虚的标志基因.
2.运用实时荧光定量PCR技术,就大鼠去势后不同时间点肾上腺和前列腺组织的Cypl7al、Srd5a2基因的表达进行测定,并结合实验时间段中组织学、代谢研究以及基因组学的结果,解释去势后雄激素的变化规律.结果表明大鼠在去势手术后,肾上腺Cypl7al基因的表达有所增加,以补偿肾上腺雄激素的分泌,直至失代偿的出现.首次证实了大鼠前列腺中存在Cypl7al基因,推测前列腺也具有合成DHEA的功能.Srd5a2基因在肾上腺中没有表达,在前列腺组织细胞中也没有检测到.
3.运用实时荧光定量PCR技术,建立了乳腺癌相关基因BRCA1、COX-2、PPARG、VEGF基因的定量检测方法,通过对正常组和乳腺癌患者该四个基因表达的测定和分析,表明这个四个基因都与乳腺癌的发生发展有着密切关系,且VEGF有望成为潜在的乳腺痛诊断标志基因.
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