【摘 要】
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新生毛细血管的生长是恶性肿瘤生长的中心环节。肿瘤发生的早期伴有新血管的生成,而且新血管生成的速度限定了肿瘤生长的速度。在血管生成抑制剂的作用下,转移瘤处于“休眠”
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新生毛细血管的生长是恶性肿瘤生长的中心环节。肿瘤发生的早期伴有新血管的生成,而且新血管生成的速度限定了肿瘤生长的速度。在血管生成抑制剂的作用下,转移瘤处于“休眠”状态,并且可以使肿瘤细胞的增殖与凋亡达到平衡而抑制肿瘤的生长。作为目前公认的较强的内源性肿瘤血管生成抑制剂——内皮抑素受到越来越多的关注。 内皮抑素(Endostatin)是由O’Relly等人从小鼠内皮细胞瘤(EOMA)培养液中提取的一种内源性血管生成抑制剂。测序表明内皮抑素是胶原ⅩⅧ C 末端的一个片段。内皮抑素抑制血管生成的特异性功能位点尚不清楚,对内皮抑素类似物片段活性也无明确报道,但该片段适当增减一定数量的氨基酸被认为仍有相似的抗血管生成活性。有数据表明,在 N 端增加不同多肽片段的重组内皮抑素蛋白或去除内皮抑素 N末端的 5 个氨基酸,对内皮抑素的体内和体外活性均无明显影响。但目前为止对于 C 末端氨基酸数量的增减对内皮抑素活性影响的研究较少。 本课题试图研究内皮抑素 C 末端的氨基酸序列与内皮抑素的生物学活性之间的关系。本次实验在设计引物时选择性的去除了内皮抑素 C末段的 7 个氨基酸(FMTSFSK)相对应的碱基序列得到内皮抑素的突变体 EM7。用基因工程的方法构建了原核表达载体 pBV220-EM7,并将
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