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背景和目的：肺癌在我国发病率和死亡率都有明显增高，其中大部分是非小细胞肺癌(NSCLC)。MicroRNA (miRNA)和表皮生长因子受体（EGFR）的表达异常对于NSCLC的发生发展均是一个非常重要的因素。我们应用组织标本和细胞株，研究miR-133b对于肺癌细胞增殖、侵袭转移能力和药物敏感性等生物学行为的影响，通过细胞转染等方法分析miR-133b与EGFR信号通路分子间的相互关系及可能作用机制。方法：1、应用实时定量逆转录多聚酶链式反应（realtime RT-PCR）检测肺癌组织标本和匹配的正常肺组织标本中miR-133b和EGFR mRNA的表达水平；应用免疫组化化学法（IHC）分析肺癌组织标本中EGFR蛋白的表达水平。2、选用生物信息学和双荧光素酶报告基因法确证miR-133b与EGFR mRNA3′非编码区域UTR的靶向结合作用。3、采用阳离子脂质体法在四种肺癌细胞株（H1650、A549、H1975和PC-9）中转染miR-133b模拟物或者抑制物，使其过表达或者抑制。随后：（1）应用流式细胞分析（FCM）方法检测癌细胞的凋亡状况；（2）应用四氮唑盐法（MTT比色法）检测癌细胞的增殖活性和对于吉非替尼的药物敏感性；（3）应用划痕法、Transwell/Matrigel试验检测癌细胞的侵袭转移能力；（4）应用realtime RT-PCR法检测癌细胞miR-133b、EGFR及其下游基因mRNA表达（；5）应用Western-blots法检测EGFR及其下游信号通路分子蛋白表达量。结果：1、在27例匹配的肿瘤组织（T）和相应非肿瘤正常肺组织（N）的检测中，NSCLC癌组织中miR-133b低表达；miR-133的表达水平和区域淋巴结受累程度、分期及脏层胸膜或脉管侵犯之间呈负相关；miR-133b的表达水平和EGFR mRNA转录产物存在着显著的负相关。EGFR mRNA水平和区域淋巴结受累程度之间正相关，EGFR蛋白水平和脏层胸膜或脉管侵犯之间正相关；EGFR蛋白阳性率为66.7%(18/27)与mRNA过表达存在基本一致性。2、生物信息学分析显示在EGFR mRNA3′-UTR的50~56位置，具有一个与miR-133b完全互补的7个核酸的种子序列；通过构建和转染EGFR@pMIR-Report-Luc质粒和miR-133b进入细胞，导致了较对照组标化荧光下降。3、转染miR-133b模拟物或者抑制物后，四种肺癌细胞的凋亡均较对照组明显增加；并且模拟物引起的凋亡也较抑制物明显增加。4、转染miR-133b模拟物后，四种肺癌细胞的侵袭转移能力降低，反之转染miR-133b抑制物后则提高了肺癌细胞的侵袭转移能力，并且对PC-9和A549细胞的调节作用更明显。5、H1650、H1975和PC-9肺癌细胞中，转染miR-133b模拟物后表现为对吉非替尼的明显敏感，而在A549、H1975和PC-9肺癌细胞中，转染miR-133b抑制物后表现为对吉非替尼的明显耐药。6、四种肺癌细胞中EGFR mRNA和蛋白水平均受到miR-133b过表达或抑制的调节，在PC-9细胞中转染miR-133b模拟物后，EGFR mRNA的下调更明显。在PC-9和A549肺癌细胞中，转染miR-133b模拟物/抑制物后，EGFR、AKT和ERK12磷酸化水平明显下调/上调，而在H1650和H1975细胞中上述改变不明显。结论：1、MiR-133b低表达促进了NSCLC的增殖、侵袭转移和对EGFR-TKI的耐药。2、MiR-133b通过靶向作用于EGFR，在转录后水平调节了内生EGFR蛋白表达水平，进而主要影响EGFR依赖的肺癌细胞中EGFR下游通路的分子活性来产生上述功能变化。该研究为此类肿瘤的靶向治疗提供了重要的理论基础。