基于荧光衍生化纳豆中DL-氨基酸检测新方法及朝药鹿茸大补汤药效物质基础研究

来源 :延边大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:feixingyuan1977
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
纳豆作为一种溶栓降脂、软化血管、防止动脉硬化的功能性保健食品备受关注。蒸熟大豆在枯草芽孢杆菌作用下发酵形成纳豆过程中会释放游离氨基酸,近年来,在纳豆黏液中发现了D-谷氨酸。但对纳豆中其他手性氨基酸的存在及功能还未见相关报道。因此本研究使用自行研制的新型手性荧光衍生化试剂DBD-trans-2-methyl-L-proline(DBD-M-Pro),基于超高效液相色谱(UPLC)-荧光(FL)检测技术建立了柱前荧光衍生化同时分析纳豆中游离DL-氨基酸的新方法,并应用于不同厂家纳豆的豆和黏液的分析。DBD-M-Pro与DL-氨基酸在60°C下反应60分钟生成非对映体,使用BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,在激发波长(Ex):450 nm,荧光波长(Em):560 nm处对非对映体进行了检测。结果4种DL-氨基酸(Gln,Asp,Glu,Ala)在20分钟内分离度(Rs)为1.65-3.50,达到完全分离。检测限为0.25-2.5 pmol。在三种不同厂家纳豆的豆和黏液中均检测到4种DL-氨基酸,且纳豆黏液中DL-Gln,DL-Glu,DL-Ala三种氨基酸的含量明显高于豆中的含量。另外可使用D/L-Gln,D/L-Asp的峰面积比值鉴别不同生产厂家。中国朝医学是朝鲜民族通过长期与疾病作斗争得出的理论与经验。其中“鹿茸大补汤”(LRDBT)是朝医药的经典名方,由鹿茸、麻黄、五味子、杏仁、天冬、麦冬、山药、薏苡仁等8味药组成,在临床上对太阴人哮喘具有明显改善症状及治疗作用。然而由于“鹿茸大补汤”的药效物质成分及体内作用机理尚不明确,因此本研究使用高分辨UHPLC-QE-Orbitrap-MS技术,结合Compound Discoverer(CD)小分子化合物分析平台及标准品对“鹿茸大补汤”药效物质基础进行了研究。通过CD分析,比较保留时间和二级质谱(MS/MS)碎裂模式,在“鹿茸大补汤”中初步鉴定出86种化合物,包括生物碱类、黄酮类、酰胺类、氨基酸等。其中有12个化合物使用标准品进一步进行了结构确证,分别为苦杏仁苷、苹果酸、柚皮素、儿茶素、腺苷、甜菜碱、鸟嘌呤、脯氨酸、组氨酸、DL-哌啶甲酸、尿嘧啶核苷酸、次黄嘌呤。为更好地解释药效成分的来源,还检测了“鹿茸大补汤”单味药的物质基础成分,并进行了比对及筛查。本研究建立了两种新的检测方法,首先基于新型荧光手性衍生试剂DBD-M-Pro柱前衍生化,建立了同时检测纳豆中4种DL-手性氨基酸的新方法。首次在纳豆和黏液中发现了4种游离DL-氨基酸,为纳豆新保健功能的研究和质量控制提供了可靠、简便的分析方法。其次,本研究首次建立了基于UHPLC-MS/MS技术,鉴定“鹿茸大补汤”中药效物质基础成分的新方法,为进一步研究体内代谢通路及药物作用靶点提供了一种有效的方法和基础数据。
其他文献
莫扎特是奥地利著名作曲家,古典时期的代表人物之一。他的一生创作了大量的钢琴作品,主要有奏鸣曲、交响曲、协奏曲、幻想曲等。莫扎特幻想曲把赋格作主要创作手法,变化迅速,充分发挥了自由的想象力。莫扎特幻想曲即调性与和声的色彩变化,音乐力度与速度的巧妙转换,主题部分的戏剧性转折和丰富多彩的句子等音乐元素,实现了这种近乎完美的幻想曲。《d小调幻想曲k397》是三首幻想曲中最为经典的一首作品,这首作品蕴含着丰
目的:心脏钠尿肽家族的心房钠尿肽(ANP)主要参与调节体液的量和血压的稳态,并具有抗缺血/再灌注损伤、抗缺氧、抗炎、抗氧化、抗增殖、抗肥大和抑制Wnt等特性。Wnt信号传导作为一条十分保守的信号通路可控制细胞的生长、分化、凋亡及自我更新,其信号失调往往会导致发育异常和疾病,如肿瘤、神经疾病及骨骼和心血管病变等,但其对ANP分泌的作用尚不甚清楚。因此,本研究的目的是利用离体搏动的大鼠心房灌流模型,观
背景和目的:肝癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,发病率和死亡率的不断升高给人类的生命健康造成了严重的危害。NME2表达与肝癌发生密切相关。但是其在肝癌发生发展中的相互作用蛋白及信号网络尚不明确,因此,本研究利用捕集离子淌度飞行时间质谱分析肝癌细胞中NME2相关蛋白及信号网络,为肝癌分子病理研究提供实验依据。研究方法:(1)生物信息学分析肝癌中NME2的表达水平及验证NME2对肝癌细胞增殖及集落形成的影
目的探讨术前CRP/Alb与NLR在预测胫腓骨中下段骨折术后出现全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)的价值,为临床预防胫腓骨中下段骨折术后SIRS的发生提供参考依据。方法收集从2016年1月1日至2020年10月30日在延边大学附属医院因胫腓骨中下段骨折入院并在我科行手术治疗的患者共74例,分为术后出现SIRS的患者33例为
目的:在了解老年胆石症患者健康商数、焦虑与自理能力现状的基础上,分析老年胆石症患者自理能力的影响因素,探讨老年胆石症患者健康商数、焦虑与自理能力的相关性,为临床医护工作者针对自理能力的提高开展个性化健康教育提供理论依据,探寻自理能力的影响因素,为构建干预模型提供科学依据。方法:本研究为非实验性研究中的描述性研究,采用便利抽样的方法,选取2019年12月~2020年5月在威海市某三甲医院消化内科住院
理答是指教师根据学生回答及反应作出的反馈和处理,具有即时性和生成性。理答是教师在幼儿园教学活动中为达成活动目标所采取的必要手段,幼儿园集体教学活动是促进幼儿发展重要组织形式,集体教育活动中的理答是幼儿与教师的双向互动,因此教师在集体教学活动中积极有效的言语理答行为不仅有助于发展幼儿的语言能力,而且能进一步促进幼儿之间人际交往能力的发展。经过对相关文献的梳理,发现教师理答行为的研究多集中于中小学,而
随着我国社会经济的发展和物质生活水平的提高,高能量饮食、低水平体育活动和久坐的生活方式越来越普遍。也因此出现了青少年体质下降,前人研究认为主要原因是青少年缺乏体育锻炼。家庭结构对于青少年的起居起着比较重要的作用,延边朝鲜族人口出现了大量外流现象其人口流动的主要原因是劳务输出。面对延边地区大量的朝鲜族的人们去韩国劳务,也导致了延边地区出现越来越多的单亲家庭和隔代家庭。因此,本文研究延边朝鲜族家庭结构
目的:了解延吉市老年人自我忽视、抑郁、健康素养现状及其在一般人口学上的差异,探讨抑郁、健康素养对老年人自我忽视的影响,为预防和控制老年人自我忽视行为的发生、促进健康老龄化的发展提供理论基础和依据。方法:本研究属于非实验性研究中的横断面调查研究,采用便利抽样的方法选择延吉市两家社区卫生服务中心作为调查场所,在社区卫生服务中心举办的健康教育讲座活动和体检日抽取自愿参加调查的老年人作为研究对象。利用一般
随着我国课程的不断改革,提高学生的自我调节学习能力成为了众多研究者们关注的内容。自我调节学习能力的培养一直是教育心理学的重点研究之一。Timothy J.Cleary研究发现,自我调节能力主要是学生的环境管理、信息获取以及学习过程中不良反应监控能力。自我调节学习作为一种学习能力,不仅有利于提高学生的学业成绩,也是学生进行终身学习提供基础,很多研究人员已经开始认识到学生具备一定的自我调节能力对于学习
随着煤炭资源开采的不断向深部发展,我国高瓦斯矿井数量显著增多,低渗透性高瓦斯煤层开采易导致突出,研究气体吸附对煤岩的损伤力学机制,可以深入探究煤岩动力灾害的演化机理。针对目前对煤体损伤的定量分析和作用机理的研究不足,从宏观角度和微观角度对煤体损伤参数进行定量分析。本文得到的重要结论如下:(1)本文采用室内试验的方法研究煤体损伤规律,监测获取其在单相以及多相耦合状态下的物理力学参数。利用自研的“可视