论文部分内容阅读
目的：通过高碘酸钠氧化法改性麦芽糖，用改性麦芽糖修饰胰蛋白酶、α-淀粉酶、脂肪酶，检验此方法是否能够提高酶活性和改善酶的性质。方法：采用高碘酸钠改性麦芽糖，使其中具有能够与酶分子中氨基结合的醛基，从而在一定条件下化学修饰胰蛋白酶、α-淀粉酶、脂肪酶。比较修饰效果后，研究保留酶活力较高的修饰胰蛋白酶的最适pH、最适温度、pH稳定性和热稳定性等。结果：改性麦芽糖的最佳条件为，高碘酸钠浓度0.05g/mL，高碘酸钠与麦芽糖质量比1.1：1，初始pH1.0，反应时间3h，反应温度30℃；修饰胰蛋白酶的最佳条件为，pH6.0，改性麦芽糖与胰蛋白酶质量比1：1，修饰温度4℃，修饰时间24h，修饰后胰蛋白酶活力保留了原酶活力的65.8%；修饰α-淀粉酶的最佳条件为，pH8.0，改性麦芽糖与α-淀粉酶质量比1：4，反应温度4℃，反应时间12h，修饰后α-淀粉酶活力保留了原酶活力的59.7%；修饰脂肪酶的最佳条件为，pH8.0，改性麦芽糖与脂肪酶质量比1：10，反应温度4℃，反应时间24h，修饰后脂肪酶保留了原酶活力的54.9%；在最佳条件下修饰胰蛋白酶后，其最适pH（约为pH9.0）和最适温度（约为50℃）较原酶没有明显的变化；将修饰胰蛋白酶和原胰蛋白酶置于不同pH下2h后测定它们的活力，结果表明，在pH9.0~10.0范围内，原酶活力与修饰酶活力分别下降了其最高活力的15.8%和9.8%；将酶置于50℃2h后，原胰蛋白酶与修饰胰蛋白酶分别保留了其置于4℃2h后活力的88.7%和94.7%。结论：此方法修饰胰蛋白酶、α-淀粉酶、脂肪酶后，它们的活力均有所下降；但对修饰胰蛋白酶的研究得知，此方法修饰胰蛋白酶后能够提高其耐碱稳定性和热稳定性。