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雪菊为菊科植物两色金鸡菊(Coreopsis tinctoria Nutt.)的干燥头状花序,具有降血压、降血脂、抑制高血糖的作用。目前雪菊药材质量评价方法及标准的欠缺,制约了雪菊的开发及应用。本论文通过生药学研究、活性成分含量测定、高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析等方面研究工作的开展,旨在为雪菊药材质量标准的建立提供依据。主要研究方法和结果如下:方法:1、生药学研究:收集了20批雪菊药材进行初步性状鉴别、显微鉴别研究,建立了以绿原酸、木犀草素为指标成分的薄层色谱鉴别方法:(1)在聚酰胺薄膜上,以36%乙酸为展开剂,紫外灯下365nm处检测绿原酸成分;(2)硅胶G板上在环己烷-乙酸乙酯-甲酸(3:5:0.5)系统中展开,Al Cl3显色,365nm下检测木犀草素成分。2、总黄酮含量测定:以总黄酮提取量为指标,通过Box-Behnken响应面法考察乙醇体积分数、料液比、超声时间和温度对总黄酮提取量的影响。筛选了雪菊总黄酮成分的最佳提取工艺,测定了总黄酮含量。3、绿原酸、木犀草素HPLC测定:使用Agilent TC-C18(4.6mm×250mm,5μm)为色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,流速1.0m L,柱温30°C,检测波长分别为328、350nm,对20批药材两种活性成分含量进行了测定并比较分析。4、雪菊药材指纹图谱分析方法:采用HPLC建立雪菊的指纹图谱,用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(A)版建立指纹图谱共有模式并进行相似度计算,用SIMCA-P 11.0软件建立PLS-DA模型分析新疆、云南雪菊质量差异。结果:1、雪菊药材舌状花单轮,黄色花瓣8枚;基部或中下部红褐色,管状花紫褐色。总苞片2层,内层长于外层;粉末的显微特征可见不定式气孔、花粉粒、薄壁细胞、导管、纤维、分泌道、花冠表皮细胞。薄层色谱鉴别可见不同产地药材在对照品位置有相同斑点,表明药材中都含有绿原酸、木犀草素成分。2、雪菊总黄酮最佳提取工艺为乙醇体积分数65%,料液比40g/m L,超声时间34min,超声温度62°C。含量测定结果表明:雪菊药材中总黄酮的含量范围为177.06~254.85mg/g。3、HPLC测定结果表明:绿原酸在浓度9.9~99.0μg/m L时与峰面积的线性关系良好,回归方程:y=13402x-652.38(R2=0.9998)。平均回收率为100.66%(n=6),RSD为1.79%;木犀草素在浓度0.97~19.40μg/m L与峰面积的线性关系良好,回归方程:y=27343x+4401.2(R2=0.9999)。平均回收率为98.89%(n=6),RSD为1.71%。该方法准确、灵敏,重复性良好,可用于雪菊绿原酸、木犀草素的含量测定。不同产地雪菊绿原酸、木犀草素含量有差异,两成分的含量范围依次为0.93~3.91mg/g,0.61~1.32mg/g。4、雪菊药材指纹图谱结果表明:指纹图谱具有17个共有峰,通过对照品指认出绿原酸、木犀草素2种成分。进一步进行相似度分析,20批样品相似度计算结果在0.942~0.992,相似度较高。结合PLS-DA得分图分析,新疆、云南雪菊被分为2类,其质量具有明显差异。通过载荷图和PLS-DA变量重要因子分布图可得出对分类贡献最重要的11种差异标志物,可作为质量控制的有效指标。