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背景肺腺癌作为一种常见的恶性肿瘤严重危害着人们的身体健康。由于肺腺癌的发生机制迄今未明,其发病率和死亡率居高不下,因此深入研究其发病机制已成为相关研究人员的当务之急。在众多非编码的小分子RNA中,MiRNA21(MiR-21)作为其中的主要一员,参与了机体内生长、代谢、发育与疾病发生,以及多种肿瘤的发生、发展、侵袭和转移过程。信号传导与转录激活因子3(STAT3)作为生物体内许多细胞因子和生长因子的主要信号传导蛋白,它在组织细胞的生理功能、细胞的分化、细胞的免疫平衡以及许多肿瘤的发生中,起着非常重要的作用。近年来越来越多的研究人员开始关注MiRNAs与STATs家族成员之间的信号转导通路,以及通路之间的相互作用关系,特别是MiR-21和STAT3信号调控通路之间的相互作用机制,更是引起了许多学者的关注。国内外许多研究者已经明确表示,STAT3可以直接的调控MiR-21,并发现在多种恶性肿瘤中显示出异常调控的作用。但是截止目前,并没有见到文献的报告,显示出MiR-21/STAT3信号转导通路在肺腺癌发生、发展中的作用及意义。本课题运用常规病理切片、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Westernblot等方法,通过检测人肺腺癌组织中MiR-21、STAT3和P-STAT3的表达状况,及其与正常肺组织之间的差异,探讨MiR-21、STAT3信号的异常表达对肺腺癌发生发展的影响以及临床意义,为临床上进一步揭示肺腺癌的发生机制奠定基础,为防治肺腺癌提供新的思考模式。目的试图通过检测MiR-21和STAT3及P-STAT3在肺腺癌发生、发展过程中的动态表达状况,分析比较与正常肺组织,癌旁组织中表达的差异性,探讨MiR-21、STAT3的异常表达对肺腺癌发生过程的影响,为临床上进一步防治肺腺癌提供理论依据。方法进行实验的所有标本来自于当地三家知名医院的检验病理科,包括解放军第三七一中心医院检验病理科、新乡医学院第三附属医院检验病理科、新乡市中心医院检验病理科。标本年限为2012年7月到2015年7月之间,其中实验所用标本包括18例正常肺组织、69例肺腺癌组织和其癌旁组织(癌组织以外2-5cm),其中转移癌51例。正常肺组织、腺癌组织和其癌旁组织、转移癌组织均经过病理诊断(手术前经过化学治疗的肺腺癌患者和复发的肺腺癌患者的病理标本均排除在外)。取得的各不同类型组织均为手术切除的新鲜组织标本,术后置于-80℃冰箱中保存备用。然后采用qrt-pcr方法检测mir-21及stat3mrna在各种不同类型组织中的表达情况,免疫印迹westernblot方法检测p-stat3蛋白在各种不同类型组织中的表达情况。采用spss17.0软件包对实验结果进行t检验及单因素方差分析等相关统计分析。结果1.常规病理诊断:经病理确诊18例正常肺组织;69例肺腺癌组织(包括高分化29例、中分化18例、低分化22例)和其癌旁组织69例,其中发生锁骨上淋巴结转移癌51例。2.mir-21的表达qrt-pcr方法检测得到mir-21在各种不同组织中的表达结果:正常肺组织为0.0017±0.001;癌旁组织为0.0180±0.005;腺癌组织为0.0990±0.035;转移癌组织为0.1270±0.135。各组之间基因的表达均具有显著性差异(p<0.05),正常肺组织与肺腺癌组织相比具有极显著性差异(p<0.01)。mirna-21基因在正常肺组织中呈现最低表达,癌旁组织中有所升高,肺腺癌组织中呈现高表达,转移癌组织中较肺腺癌中表达的更高。3.stat3基因表达qrt-pcr方法检测得到stat3基因在各种不同组织中的表达结果:正常肺组织为0.318±0.015;癌旁组织为0.629±0.020;肺腺癌组织为1.047±0.041;转移癌组织为1.236±0.016。各组之间基因的表达均具有显著性差异(p<0.05),正常肺组织与肺腺癌组织相比具有极显著性差异(p<0.01)。stat3基因在正常肺组织中呈现最低表达,癌旁组织中有所升高,肺腺癌组织中呈现高表达,转移癌组织中较肺腺癌组织中表达的更高。4.p-STAT3蛋白的表达蛋白免疫印迹技术Westernblot方法检测得到p-STAT3蛋白在各种不同组织中的表达结果:正常肺组织中为1.00±0.76,肺腺癌旁组织中为2.00±1.23,肺腺癌组织中为3.80±1.24,肺转移癌组织中为4.16±0.95。各组之间蛋白的表达均具有显著性差异(P<0.05),正常肺组织与肺腺癌组织相比具有极显著性差异(P<0.01)。p-STAT3蛋白在正常肺组织中呈现最低表达,癌旁组织中有所升高,肺腺癌组织中呈现高表达,转移癌组织中较肺腺癌组织中表达的更高。5.MiR-21与STAT3基因和p-STAT3蛋白之间的相关性运用统计学分析显示,在肺腺癌组中,MiR-21和STAT3二者之间呈现正相关性(r=﹣0.910,P<0.01);MiR-21和p-STAT3蛋白二者之间也呈现正相关性(r=﹣0.953,P<0.01);STAT3和p-STAT3蛋白二者之间也呈现正相关性(r=0.710,P<0.01)结论1.MiR-21与STAT3和p-STAT3蛋白在肺腺癌中均呈高表达,p-STAT3蛋白可能在肺腺癌的发生中起着主要的作用。2.MiR-21、STAT3的异常表达,可能与肺腺癌的发生与演进过程密切相关。