背景:蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage,SAH）是一类世界范围内公认的具有高致死率和致残率的重症脑血管疾病。大量研究表明,SAH后早期脑损伤（early brain injury,EBI）期间各种病理性反应是导致血脑屏障破坏、炎性反应损伤、神经细胞凋亡坏死和神经功能障碍的主要原因,其中炎性反应损伤被诸多研究证实在SAH后EBI中扮演重要角色。Pannexin-1通道蛋白定位表达于细胞膜,可以在激活状态时释放ATP、第二信号分子和神经递质等进入细胞外环境。既往研究发现,Pannexin-1通道蛋白参与细胞能量代谢、细胞凋亡坏死、细胞分化及细胞间生物信号传递等多种生理病理机制,其在病理性炎性反应中的作用尤为引人注目。近年来,Pannexin-1通道蛋白介导的炎性反应在心血管疾病及脑缺血相关疾病中的病理作用机制也逐渐被大家所认识,但是有关Pannexin-1通道蛋白在SAH后EBI中的作用机制尚无相关文献报道。综上所述,我们推测Pannexin-1通道蛋白在SAH后EBI期间介导的炎性反应损伤与神经元细胞凋亡坏死之间可能存在重要联系,因此,本实验课题着重针对Pannexin-1通道蛋白在大鼠SAH模型建立后EBI中的潜在作用机制进行深入研究。方法:本课题建立大鼠体内SAH模型,使用western blot、免疫组化荧光双重染色法检测Pannexin-1通道蛋白在大鼠SAH模型建立后连续的时间观察点上表达的变化及其细胞定位。同样使用western blot检测ATP配体蛋白P2X7的表达,以此来明确SAH后细胞释放ATP总量的变化。运用慢病毒转染技术分别基因敲除和上调Pannexin-1通道蛋白的表达,使用western blot、酶联免疫吸附实验（ELISA）、实时定量PCR及免疫荧光组化等实验技术明确Pannexin-1通道蛋白在SAH后炎性反应损伤及神经元细胞凋亡坏死中的具体作用及其相关信号转导机制。此外,我们采用Modified Garcia评分系统及水迷宫动物认知功能检测系统明确Pannexin-1通道蛋白对SAH后大鼠短期及长期神经功能障碍的影响。结果:实验结果表明,Pannexin-1通道蛋白在SAH后连续时间点的表达上没有明显的变化趋势,但是大鼠脑组织样本中ATP受体蛋白P2X7的表达在SAH后24小时达到高峰。我们使用慢病毒转染技术基因敲除Pannexin-1通道蛋白后,P2X7蛋白表达水平在SAH后24小时明显下降。同时我们在敲除Pannexin-1通道蛋白后发现TLRs/NF-κB信号通路介导的炎性反应在SAH后24小时显著减弱,包括TLRs/NF-κB信号通路相关蛋白表达的降低和其通路下游炎性细胞因子浓度的减少。同样在敲除Pannexin-1通道蛋白后,大鼠脑组织中神经元凋亡坏死程度明显好转,且大鼠在SAH后短期及长期神经功能障碍也得到了明显的改善。此外我们发现通过慢病毒转染过表达Pannexin-1通道蛋白后,TLRs/NF-κB信号通路相关蛋白的表达进一步升高,其下游炎性细胞因子的浓度也随之上升,并伴有更严重的神经元细胞凋亡坏死现象。结论:Pannexin-1通道蛋白在SAH后被激活开放,通过TLRs/NF-κB信号通路介导炎性反应损伤,导致神经元细胞凋亡坏死,进一步表现为大鼠在SAH后短期及长期的神经功能障碍。本课题实验的结果有助于让我们重新认识到SAH后炎性反应损伤的具体机制,也提示将Pannexin-1通道蛋白作为新的SAH治疗靶点,在改善SAH后EBI方面具有较好的临床应用前景。