糖对黄瓜子叶节培养物成花的影响及其差异蛋白质组的研究

来源 :福建师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liyan2006
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本实验通过黄瓜离体子叶节花芽分化实验体系,初步探索糖种类和浓度对植物成花的影响;并应用蛋白质组学方法和生物信息学技术,在蛋白质水平上探讨植物成花的机理。实验结果如下:1、组织培养实验结果显示:无糖或高糖处理不利于成花。在添加0.3mg/L PP333的基础上,1.5%蔗糖+1.5%果糖处理的直接花分化率最高;成花培养中蔗糖是基本的因素。果糖的最佳供应时间在开始培养后的48-72h。在供糖基础上,添加GA3处理对成花的影响不明显;添加ABA处理可提高直接花分化率;适度抑制乙烯有利于成花。2、建立并优化双向电泳实验条件,结果表明:应采用酚抽提法制备蛋白质干粉,第一向等电聚焦固相pH梯度胶条(24cm)的最适蛋白上样量为1200μg,第二向SDS-PAGE使用11.5%T的分离胶等条件,有助于提高黄瓜离体子叶节总蛋白质双向电泳的分辨率和重复性。3、通过对PP333诱导的黄瓜离体子叶节花芽分化的差异蛋白研究,经双向电泳检测到蛋白点有1000个左右,质谱分析鉴定出15个差异表达蛋白点,其中可确认有意义的差异蛋白点有5个,分别为14-3-3蛋白(R2)、核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶大亚基(R5和R9)、甲硫氨酸合酶(R10)、氨基肽酶(R16)和60S酸性核糖体蛋白(R20)。这些蛋白与光合作用、代谢作用、翻译过程及信号转导等关系密切,可能在黄瓜成花中起着不同的作用。
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