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木霉是重要的生防真菌,广泛分布于土壤、海洋及植物体等各种基质上。分布于土壤中的木霉菌,有很多种类对土传病害具有良好的抑制效果。本研究拟从土壤中分离木霉菌株,以小麦纹枯病菌和根腐病菌作为靶标菌,筛选高效拮抗木霉菌株,并探讨其促生防病效果,主要研究结果如下:1、高效拮抗木霉菌株的筛选2012年至2013从山东济宁、德州、聊城、菏泽、泰安、淄博、滨州、潍坊等地采集小麦田根部土壤,用稀释平板法分离获得70株木霉菌,再利用本实验室以前筛选保存的10株优良木霉菌株,共计80株。在此基础上,以小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cerealis)WK-207作为指示菌,从中筛选出7株对小麦纹枯病菌抑制效果较好的木霉菌株;复筛时,选择4种病原菌作为指示菌,分别是小麦纹枯病菌WK-207、黄色镰孢菌(Fusarium culmorum)WF-25、层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)JM-4、尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)WF-51,测定7株木霉菌株的生防效果,同时还对7株木霉菌株的生长速度、抑制率、耐温性、耐酸碱性、产孢量、挥发性等进行了测定,采用灰色关联的方法对选定的7株木霉菌株进行综合评价。结果表明,木霉菌株H18-1-1的灰色关联度最大,为0.7751,其次是TF28菌株,关联度为0.7727。表明H18-1-1和TF28这两个木霉菌株的综合性状与构建的理想参考菌株接近程度较大,是较好的生防菌株。2、H18-1-1和TF28木霉菌株的鉴定利用形态特征和5.8SrDNA-ITS序列分析相结合的方法对高效拮抗木霉菌株TF28和H18-1-1进行鉴定,结果表明:TF28和H18-1-1菌株在PDA培养基上菌落形态、分生孢子梗和分生孢子与深绿木霉相似,其5.8SrDNA-ITS序列与编号为HQ229943的深绿木霉相似度达到100%,确定H18-1-1和TF28木霉菌株均为深绿木霉(Trichoderma atroviride)。3、温室盆栽测定TF28和H18-1-1的防病效果及对小麦防御酶系的影响利用温室盆栽的方法测定TF28和H18-1-1两个菌株的防病效果,结果表明:接种纹枯病菌21天后施入木霉H18-1-1的处理,对小麦纹枯病的防病效果为63.63%;接种纹枯病菌21天后施入木霉TF28的处理,对小麦纹枯病的防病效果为54.45%,表明木霉菌株H18-1-1和TF28能显著降低小麦纹枯病的发病率。木霉对小麦叶片防御酶系影响的测定结果表明,H18-1-1和TF28施入3天后均能使小麦叶片的超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶等防御酶活性提高。4、沙培苗法测定木霉对小麦的促生效果评价将小麦种子经水培3天后长出的幼苗,在含有H18-1-1、TF28菌株孢子的悬浮液中进行沾根处理,转入灭菌沙土的盆中培养35天,测定木霉孢子对小麦根系活力的影响,结果表明,经H18-1-1、TF28菌株处理后的小麦植株,其根系活力明显高于对照处理。5、田间试验对不同木霉菌株的防病及促生效果评价选用H18-1-1、TF28、T10这3个菌株进行田间试验生防效果的评价,分别于小麦分蘖初期、拔节初期、灌浆后期测定小麦的生长指标及对纹枯病的控制效果,结果表明:菌株H18-1-1在分蘖初期及拔节初期对小麦的株高、根数、鲜重、干重等生长指标表现出明显的促生效果。以小麦拔节初期不同处理小麦纹枯病的发病率作为指标,评价不同菌株的防病效果,结果表明,H18-1-1处理对小麦纹枯病的防治效果为27.66%,T10和TF28的防治效果分别为25.53%和17.02%;在小麦灌浆后期不同处理小麦纹枯病的病情指数结果显示,H18-1-1处理防病效果最好,达到65.86%。综合分析田间实验的结果可以看出,H18-1-1菌株的促生防病效果最好。