论文部分内容阅读
目的:随着分子生物学和计算机应用技术的发展,分子影像学技术已成为医学影像学以及相关临床和基础研究的一个新趋势,而基因显像技术正是分子影像学技术的一个重要组成部分。基因显像技术是依据反义互补的原理,利用标记物标记特定序列的反义分子探针与体内相应的mRNA片段特异结合,通过显像设备实现对目标DNA转录状况的观察,从而了解报告基因的表达程度和表达范围,为临床治疗提供依据。分子影像学报告基因是指表达产物能够与携带影像学标记物的分子探针特异性结合并能够被影像学设备所监测到的基因,其确认是实现基因现象的关键。目前关于基因显像技术在食管癌中的研究国内外尚未见相关报道,本研究应用免疫组化法检测MMP-2基因、Survivin基因在食管鳞癌及癌周组织中的表达程度及范围,为MMP-2基因和Survivin基因作为分子影像学报告基因应用于食管癌诊治提供实验数据。方法:对34例食管鳞癌患者的癌及癌周组织标本进行连续取材并对每个组织块所制成的蜡块进行切片及HE染色,镜下观察切片并选出癌组织和癌周组织,应用免疫组化法检测MMP-2基因和Survivin基因在其中的表达情况,测量两基因在癌周食管组织中的阳性表达范围,并对该范围值与肿瘤分期(T分期、N分期、TNM分期)、肿瘤的肉眼病理分型、肿瘤的纵向长度的关系进行分析。统计方法:应用SPSS11.5统计软件对实验数据进行统计学处理,统计学方法采用t检验、单因素方差分析、直线回归及相关分析。判断标准:P<0.05为有统计学意义。结果:1. MMP-2基因、Survivin基因在癌组织中的表达34例食管癌中MMP-2阳性表达29例,阳性率为85.29%,Survivin阳性表达26例,阳性率为76.47%。2. MMP-2基因、Survivin基因在癌周组织中的表达在29例MMP-2基因阳性表达的标本中存在亚临床病灶的有25例,这25例标本中除一例标本为跳跃性粘膜下灶性转移未见阳性表达外,其余肿瘤亚临床病灶区均可见MMP-2基因阳性表达(82.75%),在肿瘤及肿瘤亚临床病灶远端区域的正常鳞状上皮中存在MMP-2基因阳性表达的有19例(65.51%)、同时伴有上皮下腺体存在MMP-2基因阳性表达的有6例(20.68%)、仅存在腺体表达有4例(13.79%)、上皮及腺体均无基因表达的6例(20.68%)。在26例Survivin基因阳性表达的标本中存在亚临床病灶的有22例,这22例标本中肿瘤亚临床病灶区均可见Survivin基因阳性表达(84.61%),在肿瘤及肿瘤亚临床病灶远端区域的正常鳞状上皮存在Survivin基因阳性表达的有15例(57.69%)、同时伴有上皮下腺体存在Survivin基因阳性表达的有4例(15.38%)、仅存在腺体表达有7例(26.92%)、上皮及腺体均无基因表达的4例(15.38%)。3. MMP-2、Survivin在肿瘤上下两端癌周组织中的阳性表达MMP-2基因在肿瘤上下两端癌周组织中的阳性表达范围分别为17.16～70.38mm和15～82.38mm,均数±标准差分别为39.24±14.05mm和39.24±14.05mm,中位数分别为36.36mm和37.87mm;在肿瘤上下两端癌周组织中的阳性表达范围<30mm的病例数分别为9例(31.03%)、8例(27.58%),<40mm的病例数分别为17例(58.62%)、15例(51.72%),<50mm的病例数分别为22例(75.86%)、20例(68.96%),<60mm的病例数分别为26例(89.65%)、21例(72.41%),<70mm的病例数均为28例(96.55%)。Survivin基因在肿瘤上下两端癌周组织中的阳性表达范围分别为3.7～76.42mm和16.12～56.32mm,均数±标准差分别为36.22±15.52mm和33.39±10.20mm,中位数分别为35.58mm和31.21mm;在肿瘤上下两端癌周组织中的阳性表达范围<30mm的病例数分别为9例(34.61%)、8例(30.76%),<40mm的病例数分别为15例(57.69%)、19例(73.07%),<50mm的病例数分别为22例(84.61%)、25例(96.15%),<60mm的病例数分别为24例(92.30%)、26例(100%),<70mm的病例数分别为25例(96.15%)和26例(100%)。4.MMP-2、Survivin在癌周组织中阳性表达的范围与肿瘤分期(T分期、N分期、TNM分期)及肿瘤肉眼病理分型的关系随着肿瘤T分期的降低,MMP-2基因、Survivin基因在肿瘤上下两端癌周组织中的阳性表达范围均呈增加趋势,其差异存在统计学意义(P值分别为0.005、0.01和0.03、0.04);在局部淋巴结转移(N1)组中两基因在肿瘤上下两端癌周组织中的阳性表达范围均明显大于其在无局部淋巴结转移(N0)组,且具有统计学意义(P值分别为0.002、0.01和0.04、0.03);随着肿瘤TNM分期的降低,两基因在肿瘤上下两端癌周组织阳性表达范围均呈增加趋势,其差异存在显著性(P值分别为0.005、0.02和0.003、0);在不同的肿瘤肉眼病理分型之间两基因在肿瘤上下两端癌周组织中的阳性表达范围的差异无显著性(P>0.05)。5.MMP-2、Survivin在癌周组织中阳性表达的范围与肿瘤的纵向长度的关系MMP-2基因在肿瘤上下两端癌周组织中阳性表达的范围与肿瘤纵向长度之间的相关性无统计学意义(P值>0.05);Survivin基因在肿瘤上端癌周组织中阳性表达的范围与肿瘤纵向长度之间存在直线回归关系,回归方程为Y=16.3708+0.532X,同时存在正相关关系r=0.5660 ,相关系数概率P=0.0026,该基因在肿瘤下端癌周组织中阳性表达的范围与肿瘤纵向长度之间也存在直线回归关系,回归方程为Y=23.7936+0.2572X,同时存在正相关关系r=0.4164 ,相关系数概率P=0.0344。结论:MMP-2基因、Survivin基因在食管癌组织中存在较高程度的表达、在相应的癌周组织中也存在一定程度和一定的范围表达,而且两基因在癌周食管组织中的阳性表达范围与肿瘤的病期进展密切相关、Survivin基因在癌周组织中的表达范围与肿瘤的纵向长度之间存在正相关,认为MMP-2基因、Survivin基因可以作为对食管癌患者进行分子影像学基因显像研究的两个候选基因。