【摘 要】
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高血压是全球重点关注的疾病问题,高血压的预防非常重要。ACE抑制药物是一种治疗高血压的药物。食物来源的ACE抑制肽与合成药物相比,具有高选择性、高安全性、高稳定性等特点。通过文献查阅,发现大米蛋白、甲鱼蛋清、苦瓜种子和猪骨胳肌肌钙蛋白这四种食物源的蛋白水解肽显示了较好ACE抑制活性,具有高血压预防的潜力,本研究对这四种食物来源的抑制肽进行了验证,筛选一个体外活性显著高的猪骨骼肌钙蛋白源ACE抑制肽
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高血压是全球重点关注的疾病问题,高血压的预防非常重要。ACE抑制药物是一种治疗高血压的药物。食物来源的ACE抑制肽与合成药物相比,具有高选择性、高安全性、高稳定性等特点。通过文献查阅,发现大米蛋白、甲鱼蛋清、苦瓜种子和猪骨胳肌肌钙蛋白这四种食物源的蛋白水解肽显示了较好ACE抑制活性,具有高血压预防的潜力,本研究对这四种食物来源的抑制肽进行了验证,筛选一个体外活性显著高的猪骨骼肌钙蛋白源ACE抑制肽,作为进一步研究其体内高血压预防机制材料。在食物源活性肽筛选基础上,以本实验室分离保存的含有ACE基因的大肠杆菌转化子作为高血压模型构建材料,对ACE基因进行原核表达和蛋白纯化,获得较高纯度的ACE,使用BP-2000和遥测监控系统测定了重组ACE在小鼠体内的活性。ACE在C57BL/6J小鼠体内可以升高血压,急性干预实验结果表明,在4.0mg/kg剂量腹腔注射 120 min 后收缩压（Systolic Blood Pressure,SBP）升高,在 210 min 时达到最大值,随后出现下降的趋势。ACE加盐离子（ACE+S组;ACE剂量:4.0 mg/kg;盐水浓度:0.9%NaCl和0.2%KCl）协同干预4周后会使C57BL/6J小鼠白天SBP显著性增加,晚上SBP无显著性差异,一定程度上影响了小鼠血压的昼夜节律,干预四周后ACE+S组小鼠的DBP也与Control组存在显著性差异,有一定上升趋势;另外ACE+S组血浆中Ang Ⅱ含量显著性增加。造模结果表明,本实验室纯化保存的ACE具有促进小鼠血压升高的活性,并与饮食中的盐离子具有一定的协同效应,小鼠高血压模型建立成功。在造模基础上,通过猪骨骼肌钙蛋白源ACE抑制肽（KRQKYDI）灌胃干预实验验证抑制肽在体内的活性,结果显示猪骨骼肌钙蛋白源ACE抑制肽可以显著性预防ACE加盐离子协同干预导致的高血压模型。进一步预防的机制研究显示,猪骨骼肌钙蛋白源ACE抑制肽通过抑制体内ACE的酶活性,降低了血浆中Ang Ⅱ的浓度,阻止了 C57BL/6J小鼠血压的升高,减弱了肾脏和肠系膜动脉的炎症反应,阻止了收缩性基因的mRNA和蛋白表达。验证结果表明,通过体外初筛的猪骨骼肌肌钙蛋白水解肽,对ACE诱导型小鼠高血压具有预防作用,猪骨骼肌肌钙蛋白是一种良好的预防高血压的食物来源。
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