近些年来,抗氧化性生物活性肽已经成为一个研究热点。本文通过蛋白酶筛选和响应面法优化酶解条件,制取了一种高抗氧化性生物活性肽酶解液。并对其体内、体外抗氧化性质进行了研究。结果表明,复合蛋白酶是相对理想的酶解工具酶。通过响应面优化得知,pH7.49、温度49.59℃、时间3.02h.为其最优酶解条件。以此工艺条件制备的生物活性肽酶解液在体外实验中对DPPH的清除率可达95.07%。本文还对含有高抗氧化性短肽的酶解液进行了IC50的测定。结果表明其对于超氧阴离子和DPPH清除率的IC50值分别为7.97mg/ml和2.89mg/ml。动物实验表明,经该酶解液灌胃后的低、中、高剂量组小鼠与标准饲料组小鼠相比肝脏组织中的CAT活力、SOD活力和MDA含量差异均显著(p<0.05),该酶解液可以提高小鼠体内过氧化氢酶(CAT)活力20.1%,提高超氧化物歧化酶(SOD)活力4.2%,降低丙二醛(MDA)含量57.4%。由此可见,本实验制备的抗氧化肽酶解液在体内和体外均具有很强的抗氧化活性。超滤分级处理酶解物,分别测定酶解物体外抗氧化活性,筛选目标酶解物。结果表明,分子量小于3kDa的酶解物,其8mg/ml浓度时DPPH·清除率94.9%,表现出较高体外抗氧化活性。选择Sephadex G-25葡聚糖凝胶对目标酶解物进行分离实验。得到分子量分别为2981Da、2561Da和1335Da的三组组分。