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甘二酯是由甘油三酯里的一个羟基取代了脂肪酸而形成的结构脂质。具有减少内脏脂肪抑制肥胖的功能，并且通过研究发现甘二酯可以有效的降低血脂的功能，因其使用价值，在当今社会，越发的受到人们的关注。本实验是利用酶法制备甘二酯，把脂肪酶进行固定化后作为催化剂，通过反应制备甘二酯后，采取分子蒸馏技术对甘二酯进行分离纯化，得到纯度较高的甘二酯。实验中多次采用单因素试验以及四元二次回归正交旋转试验，用这些方法来得到更准确可靠的理论数据，确定最佳的工艺优化条件，得到以下试验结论：（1）酶的固定化的研究。在这部分的试验中主要有四个因素对脂肪酶固定化活力有影响。包含了硅烷化试剂添加量、硅藻土颗粒与酶的质量比、以及固定化的温度、固定化的时间。并应用响应面法优化条件。得到最佳工艺条件是：硅烷化试剂添加量为0.35%、硅藻土与酶的质量比3.5:1、温度为29℃、时间为4.5h，此时固定后的脂肪酶活力为2206.67U/g。通过验证性实验预测固定脂肪酶活力相对误差为1.27%，验证了响应分析模型的可靠性。（2）米糠油制备甘二酯的研究。在这部分的试验中研究了反应温度、反应时间、固定化脂肪酶添加量、反应物质量比这四个因素对DAG产率的影响。并对米糠油甘二酯制备反应的条件进行优化试验。得到最佳的工艺条件是：温度为26℃、反应时间为10h、固定化脂肪酶添加量为8.5%、米糠油与油酸甘油酯质量比为14，此时DAG产率为58.31%。通过验证性试验验证实际条件预测的理论值为60.36%与实际值的相对误差为3.4%，确定响应分析的模型是可靠的。（3）甘二酯的分离纯化的研究。在这部分的试验中研究了进料速率、刮膜转速、进料预热温度、蒸馏温度对DAG分离的影响。并对分子蒸馏条件进行优化试验。得到最佳的工艺条件是：进料速率为0.4L/h，刮膜转速为280r/min，进料温度为80℃，蒸馏温度为200℃，经过验证性实验后得出DAG含量为82.57±0.91(%)。（4）对产物的指标进行检测的研究。研究得到产物的指标测定值为：酸值为0.29mgKOH/g，皂化值为188.7mgKOH/g，不皂化物为3.06%，过氧化值为2.13mmol/kg。符合国家对二级米糠油的指标。