猪常温精液稀释液配方的筛选与优化

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猪人工授精的成败在很大程度上取决于精液的质量。由于猪精子对低温比较敏感,冷冻保存精液的效果较差,因而在猪人工授精中主要使用常温保存精液。为此,国内外研究者开展了大量关于猪精液常温保存的研究工作,并研制出多种稀释液配方。随着我国猪人工授精范围的逐渐扩大,精液稀释液的需求量也越来越大,而对种类繁多效果不一的稀释液配方,由于缺少系统的理论研究,为养殖企业在稀释液配方的选择上带来诸多不便。因此,研究开发国内优良稀释液配方,对增加养猪效益、推动猪人工授精技术的应用与推广具有重要意义。为筛选出保存效果稳定的稀释液配方,本研究选取5种常用的稀释液配方进行对比试验,并筛选出一种保存效果较好的稀释液配方进行优化,最后将自配的两种保存效果较好稀释液与生产上常用的3种进口的中长效稀释粉进行对比试验,为猪人工授精中稀释液配方的选择和研发提供依据。本研究获得以下主要结果:1.在5种常用的稀释液中,Modena稀释液保存后精子的有效存活时间(5.5d)最长,显著高于BTS和Ⅰ稀释液(P<0.05):BTS和Ⅰ稀释液保存后精子的有效存活时间显著高于:Kiev和IVT稀释液(P<0.05);但BTS和Ⅰ稀释液之间差异不显著(P>0.05),精子的有效存活时间分别为3.4d和3.9d; Kiev和IVT稀释液之间差异不显著(P>0.05),精子的有效存活时间分别为2.2d和1.8d。在1-2d的精液保存中,BTS、Modena和Ⅰ稀释液保存后精子的活力、质膜完整率和顶体完整率显著高于Kiev和IVT稀释液(P<0.05), BTS、Modena和Ⅰ稀释液之间差异不显著(P>0.05);在3-4d的精液保存中,Modena稀释液保存后精子的活力、质膜完整率和顶体完整率显著高于BTS和Ⅰ稀释液(P<0.05)。2.Modena中添加3~5g/L的BSA能显著延长猪精子有效保存时间、提高精子活力和质膜完整率、降低MDA的浓度(P<0.05),但对顶体完整率和T-AOC的浓度影响不大(P>0.05),其中添加4g/L的BSA效果最好,有效保存时间为7.5d,经过7d保存后精r活力、质膜完整率、顶体完整率分别为0.54、49%和78%,T-AOC和MDA的浓度分别为1.03U/mL和17.51nmol/mL。研究结果表明,Modena中添加BSA能够提高常温保存精子的质量,其适宜添加量为4g/L。3.在3种商品稀释液和两种自配稀释液中,越丰-Ⅰ稀释液保存精液后精子的有效存活时间(11.9d)最长,显著高于Modena+BSA和CXM-MY稀释液(P<0.05);Modena+BSA和CXM-MY稀释液保存后精子的有效存活时间显著高于Modena和CXM-ZHL稀释液(P<0.05);但Modena+BSA和CXM-MY稀释液之间差异不显著(P>0.05),精子的有效存活时间分别为9.5d和9.9d;Modena和CXM-ZHL稀释液之间差异不显著(P>0.05),精子的有效存活时间分别为6.1d和5.6d。当精液保存时间小于6d时,越丰-Ⅰ、Modena+BSA和CXM-MY稀释液中精子的活力、质膜完整率和顶体完整率显著高于Modena和CXM-ZHL稀释液(P<0.05),越丰-Ⅰ、Modena+BSA和CXM-MY稀释液之间差异不显著(P>0.05):当精液保存时间大于6d时,越丰-Ⅰ稀释液中精子的活力、质膜完整率和顶体完整率显著高于Modena+BSA和CXM-MY稀释液(P<0.05)。另外,5种稀释液的pH都呈弱碱性,保存精液后pH呈先上升后下降再缓慢上升的趋势。精液保存4d后,CXM-ZHL稀释液pH下降较快,其他4种稀释液的pH平稳上升。
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