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目的:急性缺血性脑卒中(Acute ischemic stroke,AIS)是一种复杂的多因素疾病,传统的治疗手段是恢复缺血区的血流灌注,但是这种方法会引起缺血再灌注损伤(IRI)。在这种情况下,需要对新的神经保护措施进行探索。肢体缺血预处理(limb ischemic preconditioning,LIPC),是指预先对肢体进行反复短暂的缺血再灌注处理,激发机体的内源性保护机制,从而对远隔缺血器官产生保护作用。但是关于LIPC的作用机制至今尚未完全明确,特别是自噬在其中的作用机制。方法:将60只Wistar大鼠按随机原则分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、肢体缺血预处理组(LIPC组)、3-甲基嘌呤组(3-MA组),每组15只。制作脑缺血再灌注、LIPC及3-MA干预大鼠模型,在脑缺血2h再灌注24h后进行神经功能缺陷评分和脑梗死体积测定,HE染色观察细胞形态学改变,Western Bloting法检测自噬相关蛋白Beclin-1、Cathepsin B的表达。结果:1、神经功能缺陷评分:Sham组反应灵敏,无神经功能障碍,与Sham组比较,I/R组,LIPC组,3-MA组均出现程度不同的神经功能障碍(P<0.05)。与I/R组比较,LIPC组症状评分明显降低(P<0.05)。LIPC组与3-MA组比较无显著差异(P>0.05)。2、脑梗死体积测定:TTC染色后,肉眼观Sham组脑组织呈红色,无脑梗死。与Sham组比较,I/R组,LIPC组,3-MA组均出现程度不同的脑梗死(P<0.05),梗死区为白色,其中I/R组的梗死区面积最大。与I/R组比较,LIPC组脑梗体积显著减小(P<0.05);与LIPC组比较,3-MA组脑梗体积减小(P<0.05)。3、病理形态学观察:HE染色后,使用光学显微镜进行观察,Sham组细胞形态呈圆形或椭圆形,间隙正常,胞膜完整,胞核清晰、居中,胞质可见尼氏小体。与Sham组比较,I/R组细胞呈急性缺血性改变,胞质为深红染,细胞缩小变形,胞核固缩,胞质内尼氏小体消失(P<0.05)。与I/R组比较,LIPC组脑组织病理学改变明显减轻(P<0.05);与LIPC组比较,3-MA组细胞损伤减轻(P<0.05)。4、脑缺血再灌注后各组自噬相关蛋白Beclin-1、Cathepsin B的表达:与Sham组比较,I/R组Beclin-1、Cathepsin B的蛋白表达明显增强(P<0.05);与I/R组比较,LIPC组Beclin-1、Cathepsin B的蛋白表达明显减弱(P<0.05);与LIPC组比较,3-MA组Beclin-1、Cathepsin B蛋白表达减弱(P<0.05)。结论:(1)I/R能够激活自噬,造成脑组织的损伤。(2)LIPC可能通过逆转自噬相关蛋白Beclin-1、Cathepsin B的过高表达,对IRI大鼠发挥保护作用。(3)自噬抑制剂3-MA能够增强LIPC的脑保护作用。