从单雌蜱繁殖群中选出未吸血雌成蜱60只,随机分成两组,一组半饱血,另一组不吸血。分离未吸血和半饱血两状态下的蜱唾液腺。经过总RNA提取,第一链合成、长距离扩增、Ras Ⅰ酶切、添加接头,扣除性杂交和选择性扩增等步骤,分离出差异表达基因的cDNA片段。将第二次扩增产物的纯品插入pGEM T-Easy载体,转化DH5a感受态。通过克隆鉴定和序列测定,获得120个有效片段,其中84个认定为序列表达标签（EST）。RT-PCR分析证实,由文库随机选出的10个片段在吸血的雌成蜱唾液腺表达,未吸血的不表达。 与NCBI数据库的片段进行序列比对,结果如下:文库里的120个片段中,90个找到了具有一定相似性的序列,其中与其他蜱的已知基因具有相似性的片段21个,与按蚊、库蚊、钩虫、奥斯特线虫等其他吸血寄生虫基因有一定相似性的片段19个。在与蜱已知基因有相似性的21个片段中,7片段被认定为EST,其中5个具有Poly（A）,2个具有ACGCGGGG;2个既具Poly（A）又具ACGCGGGG（即为全长基因,其中1个已被Genbank接收,登录号为DQ021902）。HaB1和Ha7.7是从上述与蜱已知基因有相似性的EST中筛选而来。 根据HaB1的序列设计出HaB1未知末端扩增引物HaB1-GSP₁和HaB1-GSP₂。用HaB1-GSP₁和UAP扩增由半饱血雌成蜱唾液腺总RNA反转录而成的第一链,HaB1-GSP₂和AUAP做巢式扩增,即得HaB1的未知3’-末端。根据HaB1及其3’-末端序列拼接结果,设计GP₂₉的全长扩增引物HaB1-FLP⁺、HaB1-FLP^-,以此扩增cDNA第一链获得新基因GP₂₉（登录号:AY803896）全长。如上设计扩增Ha7.7之5’-端的引物Ha7.7-GSP₁、Ha7.7-GSP₂、Ha7.7-GSP₃和扩增GP₁₅的全长引物Ha7.7-FLP⁺、Ha7.7-FLP^-。克隆Ha7.7得其未知部分和全长GP₁₅（登录号:DQ020265）。RT-PCR分析表明:亚洲璃眼蜱成蜱唾液腺只在吸血时表达两基因。