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论文以铁皮石斛无菌苗幼嫩组织(茎段、叶片、茎尖和幼芽)为外植体,经过对不同组培方式、激素种类与浓度、最适环境条件优化等系列研究,最终建立了经丛生芽诱导途径和拟原球茎诱导途径两套较为完整的组织培养再生体系。并针对在不同光照、不同培养方式和不同有机添加物条件下拟原球茎的次生代谢产物含量变化规律进行了初步研究。主要试验结果如下:1.铁皮石斛快繁技术(1)丛生芽途径铁皮石斛组培快繁的最佳基本培养基为MS,以铁皮石斛无菌苗的带腋芽茎段为材料,诱导丛生芽,最佳激素浓度配比为NAA0.1mg/L+6-BA2.0mg/L,30d增殖系数为2.82,60d增殖系数为4.8。(2)PLBs途径分别以铁皮石斛幼嫩茎段、叶片、茎尖和幼芽为外植体进行拟原球茎(PLBs)诱导,结果显示,茎段和幼芽的诱导率较高。以茎段为外植体,PLBs最佳诱导培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA1.0mg/L+2,4-D2.0mg/L,以幼芽为外植体,PLBs的最佳诱导培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA1.0mg/L+2,4-D2.0mg/L。PLBs增殖最佳培养基为MS+NAA0.1mg/L; PLBs分化最佳培养基为MS+NAA0.1mg/L+6-BA1.0mg/L。(3)壮苗生根铁皮石斛幼苗壮苗的最佳培养基为MS+0.5mg/LIBA+0.5mg/L NAA。同时,单独使用0.5mg/L NAA的培养基中小苗生根快,根数多。香蕉泥能促进幼苗根系的生长。组培苗移栽到纯树皮的基质中,成活率最高。2.拟原球茎次生代谢产物积累规律研究对PLBs的生长规律及其次生代谢产物(总生物碱含量和多糖含量)积累动态进行了研究。结果表明,PLBs的生长大致呈“S”曲线,在第40d左右达到了生长高峰。此时,总生物碱含量和多糖含量也达到了最大值。在PLBs的分化过程中,当PLBs分化出叶时,PLBs的次生代谢产量均达到分化期最高,之后的幼苗期次生代谢产物含量均略有下降。黑暗条件下PLBs鲜重增殖率明显低于光照条件下,且铁皮石斛PLBs的次生代谢产物积累受到抑制。液体培养下的PLBs生长曲线均大致呈“S”型曲线,液体培养下PLBs的鲜重增殖率高于固体培养方式。液体培养中多糖含量和生物碱含量均高于固体培养。不同有机添加物对PLBs次生代谢产物积累产生不同的影响。其中土豆培养基的PLBs鲜重增殖率最大,香蕉汁培养基中的PLBs生物碱含量最高,而苹果汁培养基中的的多糖含量最高。