肝移植受者病肝组织和血PBMC中HBVcccDNA与血清HBVDNA相关性研究

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目的定量检测乙肝相关性终末期肝病肝移植受者病肝组织HBVcccDNA、术前PBMC中HBVcccDNA和血清HBVDNA,并探讨其关系,为乙肝相关性终末期肝病肝移植受者抗病毒用药提供指导和术后乙肝复发提供预警。方法收集武警总医院2010年12月至2011年1月期间21例乙肝相关性终末期肝病肝移植受者病肝标本和术前血清标本,采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术对病肝组织HBVcccDNA、PBMC中HBVcccDNA和血清HBVDNA进行定量检测,并分析病肝组织HBVcccDNA、血PBMC中HBVcccDNA与血清HBVDNA的关系。另选取10例非乙型肝炎肝移植受者作为阴性对照。结果1.14例乙肝相关性肝病肝移植受者病肝组织检测到HBVcccDNA,定量为1.23×103拷贝/mg-6.88×106拷贝/mg,检出率为70%;7例血清中检测到HBVDNA,定量为2.6×103拷贝/ml-5.87×104拷贝/ml,检出率为30%;2例术前PBMC中检测到HBVcccDNA,定量为1.32×103拷贝/ml和1.33×103拷贝/ml,检出率约为10%。2.病肝组织HBVcccDNA定量和检出率显著高于血清HBVDNA定量和检出率(取对数值:4.23±1.80VS2.01±2.29,P=0.048;70%vs30%);病肝组织HBVcccDNA定量与血清HBVDNA定量呈正相关(r=0.630,p=0.002)。3. PBMC中HBVcccDNA检出率明显低于血清HBVDNA的检出率,仅2例肝移植受者术前PBMC中检测到HBVcccDNA,定量分别为1.32×103拷贝/ml和1.33×103拷贝/ml;这2例HBVcccDNA阳性受者的血清HBVDNA定量分别为1.25×103拷贝/mg和<1×103拷贝/ml。血清HBVDNA阳性有7例,定量为2.6×103拷贝/ml-5.87×104拷贝/ml。PBMC中HBVcccDNA与血清HBVDNA无相关(p>0.05).结论1.乙肝相关性肝病肝移植受者病肝组织内HBVcccDNA水平与术前血清HBVDNA呈正相关,但血清HBVDNA与肝组织内HBVcccDNA相关性不强,且并非完全平行。特别是血清HBVDNA阴性受者,肝组织内仍能检测到HBVcccDNA,表明有时定量检测血清HBVDNA的水平并不能真实反应肝组织内病毒复制的变化,不能一概通过血清HBVDNA定量来预测肝组织内HBVcccDNA定量,应直接检测肝组织内HBVcccDNA,才能更准确评定抗病毒治疗效果。2. PBMC中HBVcccDNA与血清HBVDNA无相关,且乙肝相关性肝病肝移植受者PBMC中HBVcccDNA检出率明显低于血清HBVDNA检出率,但值得注意的是肝移植术后虽清除了受者体内最大的病毒库-肝脏,但PBMC中HBVcccDNA不会随着新肝的植入而被清除,可能会成为新肝乙肝再发的来源之一。因此,PBMC中HBVcccDNA阳性移植受者术后应持续服用抗病毒药,以防乙肝复发。3.病肝组织内HBVcccDNA检出率明显高于PBMC中HBVcccDNA和血清HBVDNA的检出率。但对于肝移植受者来说,术前PBMC中HBVcccDNA和血清HBVDNA的检测则更为重要,肝移植术后病肝已被切除,但PBMC中HBVcccDNA和血清HBVDNA并不会随着肝移植而被清除,故肝移植受者术前应检查PBMC中HBVcccDNA和血清HBVDNA,作为肝移植术后乙肝复发的预警指标来预测乙肝复发的可能性。
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