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以小黑杨（Populus simonii×P.nigra）单倍体植株为试材,采用根癌农杆菌介导法进行胆碱氧化酶基因（codA）的遗传转化,获得卡那霉素抗性植株4株,最高转化率为1.8%。经PCR检测、Southern斑点杂交及Southern印迹杂交,证明codA基因已经整合到小黑杨单倍体植株基因组中。通过RT-PCR和荧光定量PCR分析证实,转入的外源基因能够正常的转录。在盐胁迫实验中,转基因植株的耐盐能力较对照植株有所提高。研究结果如下: （1） 确定了筛选小黑杨单倍体植株转化体的选择抗生素为卡那霉素,叶片不定芽诱导卡那霉素适宜浓度为40 mg·L-1,生根诱导卡那霉素临界浓度为20 mg·L-1。 （2） 测试了四种头孢类抗生素的有效抑菌浓度及对小黑杨单倍体植株叶片分化的影响。确定在小黑杨的遗传转化实验中使用头孢噻肟钠作为抑菌剂,最佳浓度为200 mg·L-1 （3） 建立了以小黑杨单倍体植株叶片为外植体的遗传转化体系: 预培养:选择苗龄为3周或4周的叶片预培养2d（培养基中可加入1.5倍的CaCl2进行诱导）。 侵染:降OD600=0.5的菌液用pH值为5.4的植物液体培养基重悬4～6 h,无菌水稀释至OD600=0.1,侵染时间为5～10 min。 共培养:于分化培养基中置暗处共培养2～3d。 选择培养:转入含卡那霉素浓度为40 mg·L-1的选择培养基上,进行选择培养,同时用200 mg·L-1的头孢噻肟钠进行脱菌。 生根培养:获得卡那霉素抗性芽后,待芽长到2 cm左右,将卡那霉素抗性植株转入生根培养基中进行生根培养。将4个转基因株系的无菌苗移栽至温室,平均移栽成活率为81.2%。 （4） 转基因植株的耐盐性实验表明,4个转化株系在NaCl和NaHCO3胁迫下生根能力和耐胁迫能力均高于对照植株。NaCl耐盐试验中,转基因植株耐受NaCl的极限浓度为0.8%,而对照植株仅为0.6%;NaHCO3耐盐试验中,转基因植株耐受NaHCO3的极限浓度为0.08%,而对照仅为0.06%。4个转基因株系耐盐能力由强到弱依次为T4、T1、T2、T3。