甾体化合物具有多环骨架结构,在维持正常的生理功能作用极其重要。在甾体母核中引入杂原子、杂环等取代基,可以改变其原有的生物活性,使其具有抑菌、消炎、抗癌等特性,广泛应用于医学、生物、农业等领域。本课题组前期合成的B降胆甾苯并咪唑化合物具有良好的抗肿瘤活性,对肿瘤细胞具有良好的抑制作用,尤其是人卵巢癌（SKOV3）细胞。基于此,本课题组在甾体母核3位引入生物素,合成了系列3-生物素-B-nor胆甾苯并咪唑衍生物。本论文以3-生物素-B-nor胆甾苯并咪唑衍生物为研究对象,探讨此类化合物与ct-DNA的相互作用及抗乳腺癌机制,并进一步研究甾体化合物下调雌激素受体ERα的生物性能。研究内容分为三部分:1、在近似生理条件下,研究3-生物素-B-nor胆甾苯并咪唑衍生物与ct-DNA的相互作用机制。2、以MCF-7细胞为对象,探讨3-生物素-B-nor胆甾苯并咪唑衍生物的抗乳腺癌机制。3、选择几种不同类型的甾体化合物,进行雌激素受体（ERα）下调剂的筛选,为进一步研究甾体化合物在抗乳腺癌机制方面的应用提供参考。具体研究内容如下:一、采用光谱法（如紫外光谱法、荧光光谱法、圆二色光谱法等）、粘度法、分子对接技术等手段,研究3种不同类型的3-生物素-B-nor胆甾苯并咪唑衍生物与ct-DNA的相互作用机制。紫外光谱表明,,这些化合物均能诱导ct-DNA发生增色效应,初步推断二者作用方式是以沟槽作用为主,化合物3可能伴随静电作用。荧光光谱可以起到验证化合物与ct-DNA是以沟槽作用结合,说明二者发生作用的荧光猝灭过程是静态淬灭。圆二色光谱的结果显示,这类化合物不能使c t-DNA碱基对堆积而成的正峰发生变化,ct-DNA右手螺旋出现的负峰有轻微的减色现象。从粘度实验看,化合物与ct-DNA发生作用,粘度并无明显改变,表明二者是沟槽作用。由分子对接结果显示,三个化合物都是以沟槽模式为主与c t-DNA作用,化合物都有着微弱的静电作用,其中化合物3稍强。二、对3-生物素-B-nor胆甾苯并咪唑衍生物进行体外抗肿瘤活性,发现它们具有良好的细胞毒活性;化合物可以抑制MCF-7细胞的迁移和改变其细胞形态。检测化合物对MCF-7细胞凋亡影响,结果发现它们在0-20μM浓度范围内可以诱导MCF-7细胞凋亡,浓度过大会进入坏死阶段。还检测了化合物作用细胞后p53、MDM2、C-myc、ERα等多种基因的表达,发现有p53-MDM2联级反应的存在。三、通过Cignal ERE Reporter（luc）Kit试剂盒与双荧光素酶检测试剂盒,筛选几种不同类型的甾体化合物对MCF-7细胞内的ERα活性;进一步研究雌激素受体ERα下调。