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目的:研究甜菊苷对小鼠肾纤维化的抑制作用及其可能的机制。方法:体内实验选用雄性KM小鼠,随机分为假手术组、单侧输尿管结扎(UUO)模型组、甜菊苷50和100 mg/kg组以及阳性药螺内酯20 mg/kg组。给药组小鼠术后每天给予灌服相应的药物,假手术组和UUO模型组小鼠灌服等体积双蒸水。给药14天后,取空腹血和肾脏,测定各项生化指标,包括血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、肾组织中羟脯氨酸(Hyp)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px);采用HE和VG染色观察肾组织结构的变化;用Western blot方法测定肾组织中的α-SMA、collagen Ⅰ和collagen Ⅲ蛋白表达,以观察甜菊苷抗肾纤维化的疗效。同时测定肾组织中的PPARγ、NF-κB p65、TGF-β1、STAT3、p-STAT3、Smad2/3、p-Smad2/3、Smad4 和 Smad7 蛋白表达,以探讨甜菊苷抗肾纤维化的潜在机制。在体外,采用了 LPS诱导大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E间质转化模型和TGF-β1刺激大鼠肾成纤维细胞NRK-49F增殖分化模型。在LPS诱导NRK-52E细胞间质转化模型中,通过Western blot方法测定E-cadherin、Vimentin、α-SMA、PPARγ、NF-κB p65、STAT3、p-STAT3、TGF-β1、Smad2/3 和 p-Smad2/3 蛋白表达。为证实甜菊苷对PPARy的激活作用,应用PPARγ抑制剂GW9662预处理NRK-52E细胞2 h,观察甜菊苷抑制LPS诱导NRK-52E细胞间质转化的作用是否受到影响。在TGF-β1刺激NRK-49F细胞模型中,通过Western blot方法测定甜菊苷对α-SMA、collagen Ⅰ、collagen Ⅲ、STAT3、p-STAT3、Smad2/3 和 p-Smad2/3 蛋白表达的影响。结果:在动物实验中,给予甜菊苷50和100 mg/kg治疗的小鼠,BUN和肾组织中Hyp含量降低,肾组织中GSH-Px水平升高,肾小管萎缩和肾间质纤维化的程度减轻,胶原面积比率降低,尤以100 mg/kg组的作用更为明显(P<0.01)。Western blot结果显示,甜菊苷可降低肾组织中α-SMA、collagen Ⅰ、collagen Ⅲ、NF-κB p65、TGF-β1、STAT3、p-STAT3、Smad2/3 和 p-Smad2/3 的蛋白表达(P<0.05 或P<0.01),增加PPARγ和Smad7的蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。体外细胞实验结果显示,甜菊苷可显著上调NRK-52E细胞内E-cadherin和PPARy蛋白表达,下调 Vimentin、α-SMA、NF-κB p65、p-STAT3、TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。而经PPARy抑制剂GW9662预处理后,甜菊苷增加E-cadherin,降低 Vimentin、α-SMA、NF-κB p65、p-STAT3、TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3表达的作用被减弱或取消(P<0.05或P<0.01)。在TGF-β1刺激的NRK-49F 细胞中,甜菊苷可以显著降低 α-SMA、collagen Ⅰ、collagen Ⅲ、p-STAT3、Smad2/3 和 p-Smad2/3 蛋白的表达(P<0.05 或P<0.01)。结论:甜菊苷具有抑制小鼠肾纤维化的作用,其机制可能是通过激活PPARγ和抗氧化作用,随后抑制NF-κB介导的STAT3活化和TGF-β1表达,从而使Smad信号通路受抑而产生的。甜菊苷能够直接抑制STAT3和Smad2/3的磷酸化,这可能也是它的作用机制之一。