白细胞介素13是在1993年被命名的一种由活化T_H2细胞分泌的细胞因子。其生物学活性与白细胞介素4有许多相似之处，可抑制单核细胞释放炎症因子；促进B细胞繁殖和转化；抑制HIV-1病毒的复制和肿瘤的生长，对某些上皮细胞瘤具有高度毒性。临床上IL-13在许多疾病，特别是在变态反应性疾病，如哮喘的病理发展过程中有重要作用。鉴此，其在实验和临床应用中的作用倍受关注。 为了获得高效表达人IL-13的表达菌株，生产具有生物学功能的IL-13，并研究其在体外诱导DC的作用，我们应用毕氏酵母表达系统表达人重组IL-13，经分离纯化后，对其生物学活性进行测定，并就其在体外诱导DC的作用及机制进行研究。 一．重组人IL-13在毕氏酵母中的表达 我们根据文献报道的人IL-13基因序列，并充分考虑到酵母菌蛋白质合成时密码子的偏爱性，在不改变IL-13蛋白质序列的前提下，人工合成6条IL-13基因片段和5条连接片段，经加磷反应、连接反应、PCR后获得两条大片段，再用TaqDNA多聚酶经PCR扩增，形成人工IL-13的全长片段，将其连接至克隆载体pSK中，测序正确后，再将IL-13基因片段连接至酵母表达载体pPICZαA，获得用于酵母表达IL-13的重组质粒pPICZ α A-IL-13。用SacI酶切重组质粒pPICZ α A-IL-13使其线性化，再电转化至毕氏酵母菌株GS115中，经Zeocine加压筛选后，获得表达量相对较高且分泌稳定的rhIL-13基因工程菌株。应用全自动发酵装置进行发酵，表达上清中目的蛋白的表达量达25mg/L。对上清经透析、超滤浓缩、上柱，分离纯化获得高浓度的IL-13蛋白质（纯度＞95％）。 — — 二－H3的……的 根据报道我们用民l；细胞株来检测毕氏酵母表达的人重组IL13与 标准品几习3，结果表明我们用毕氏酵母表达的人重组ILl3达到标准 品生物学活性要求，以剂量依赖的方式刺激BHl细腑增殖。ILl3与 IL一在许多生物学功能上相似，ILA在体外可诱导外周血单核细胞向 DC转化中有重要作用，因此我们考虑用ILl 来替代几个体外诱导DC。 实验发现ILl3也同样有体外诱导外周血单核细胞向DC增殖分化的作 用，表型分析 MHCll、CDIa、CD80、CD83、CD86等 DC指标和混合淋 巴细胞反咖激T细胞增殖的作用与几A诱导得的成熟DC并无显著差 别，未成熟比的摄取抗原的能力也很强。因此几l 为体外诱导DC提 供了一条有效途径。