AcMNPVorf-142基因是杆状病毒共有的29个核心保守基因之一，位于AcMNPV基因组123632nt～125065nt之间，阅读框全长1434bp，编码477个氨基酸，理论分子量为49kDa，故又名Ac-49k，该基因位于ie0内含子区域，其功能未知。序列分析表明，在目前已知的26株以磷翅目昆虫为宿主的杆状病毒基因组中都存在与orf-142基因相似的基因。启动子预测分析显示该基因启动子同时包含有早、晚期启动子的核心元件TATAA...CATT和ATAAG。前人预测ie0基因以早期启动子模体TATAA…CAGT进行转录，但并不清楚orf-142基因是以早启期子还是以晚期启动子进行转录。 本研究的主要工作是制备了抗Ac-49K的多克隆抗体以检测orf-142基因的原位表达时相。首先，本研究克隆并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了AcMNPVorf-142基因：利用PCR技术将orf-142基因的完整ORF从AcMNPV基因组中扩增出来，并连接到pET-28a载体上；构建成大肠杆菌重组表达载体pET28a-orf142；再用IPTG诱导被转化的E.coliBL21(DE3)表达Ac-49K重组蛋白，经超声破碎后，SDS-PAGE分析表明表达产物以不溶性的包涵体形式存在。 接着，本研究将orf-142基因在大肠杆菌中的表达产物经SDS-PAGE纯化后，作为抗原免疫雄性昆明小鼠，制备得到较高效价的抗Ac-49K的免疫血清。经初步纯化和去除交叉反应性抗体后，该血清显示了良好的特异性，可作为进一步研究AcMNPVorf-142基因功能和分子机制的辅助材料。 最后，用所制备的免疫血清通过Westernblot免疫印迹法检测了感染AcMNPV后不同时间点的草地夜蛾细胞Sf9中orf-142基因的表达情况，结果显示与预期相符的约49kD的Ac-49K蛋白在感染后24小时即可检测到，在24至72小时之间达到最高水平，该基因的表达时相完全符合晚期基因表达的特征。但检测结果显示该基因在整个感染过程中维持低水平表达，表明其启动子可能是个晚期弱启动子。 本研究所做工作的意义在于为用免疫学手段来进一步研究AcMNPVorf-142基因的功能提供了必要的辅助材料—抗Ac-49K的免疫血清，并对AcMNPVorf-142基因在受感染细胞内的表达做了初步的探索。