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目的: 粘液腺癌是贲门癌较为少见的一种病理类型肿瘤,而Ska2与恶性肿瘤形成、侵袭性有着密切关系。本研究分别对进展期贲门粘液腺癌和非粘液腺癌中Ska2表达情况进行检测,以期找到在进展期贲门癌不同病理类型Ska2表达差异及其与临床病理特征的关系,为临床诊疗及科研提供数据支持。 方法: 回顾性研究安阳市肿瘤医院2013-2016年期间经术后病理证实为粘液腺癌和非粘液腺癌各40例。其中粘液腺癌组中男性30例,女性10例,年龄52~84岁,中位年龄61岁,平均年龄60岁。非粘液腺癌组中男性31例,女性9例,年龄39~82岁,中位年龄59岁,平均年龄58岁。根据2010年国际抗癌联盟/美国癌症联合委员会( UICC/AJCC)分期原则,本研究纳入粘液腺癌:I期3例,II期16例,III期21例;T26例,T330例,T44例;N010例,N19例,N213例,N38例。非粘液腺癌:I期2例,II期14例,III期24例;T23例,T334例,T43例;N05例,N110例,N213例,N312例。另选取10例睾丸精原细胞瘤标本作为免疫组化的阳性对照。Ska2在 mRNA和蛋白水平上的表达分别采用实时荧光定量RT-PCR和Western blot、免疫组化的方法进行检测。应用SPASS22.0统计软件,分析贲门粘液腺癌与非粘液腺癌Ska2的表达情况及与临床病理类型之间的关系。 结果: 1.免疫组化的结果通过纳入的标本行进免疫组化检测分析,我们发现 Ska2蛋白在粘液腺癌中阳性表达高达90%,而在非粘液腺癌中表达仅为42.5%,对比发现粘液腺癌组 Ska2蛋白的表达明显高于非粘液腺癌组,统计分析提示有统计学差异(p=0.002)。我们进一步针对粘液腺癌与非粘液腺癌的相关临床、病理特征进一步分析发现 Ska2在两组表达情况与年龄、Lauren分型、神经侵犯、脉管癌栓、ki-67阳性、T分期、N分期、TNM分期无明显统计学差异(p>0.05)。 2.Western blot实验结果凝胶成像系统显示目的蛋白Ska2大小约为14 kDa,同时以蛋白大小为36 kDa的甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)作为内参。应用灰度分析软件(ImageJ软件)对目的蛋白(Ska2)条带进行灰度分析,用与 GAPDH灰度值的比值表示。Western blot结果显示目的蛋白在贲门粘液腺癌中表达量较非粘液腺癌高(p=0.01),此方法结果与免疫组化所得出的结果相一致。 3.RT-PCR检测结果采用荧光定量RT-PCR法检测Ska2 mRNA在贲门粘液腺癌与非粘液腺癌。其中选择的内参对照组为 GAPDH。结果显示Ska2基因扩增水平在粘液腺癌与非粘液腺癌两组中无明显统计学差异(p>0.05)。 结论: Ska2基因表达在贲门粘液腺癌与非粘液腺癌中可能存在差异,并且前者较后者表达更高,但 Ska2过度表达在贲门癌中与肿瘤侵袭性关系可能不大,但需要进一步扩大样本证实。