尖晶石型硫化物的模拟酶特性及其在分析检测中的应用

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模拟酶,是一类具有天然酶特性的人造酶模拟物。与天然酶相比,具有成本低廉、易于制备和保存、性质稳定等优势,因此,在生化分析等领域均具有较高的应用价值。如今,已有大量的模拟酶被用来模拟不同类型的天然酶。但是,合理设计模拟酶材料来获得更高的催化活性,以及开发新的模拟酶类型来拓展模拟酶的应用范围仍然是目前的研究重点。尖晶石型硫化物材料是一类金属硫化物,其结构中具有可调换的金属位点,使其可以通过调换离子种类来获得不同的性能。此外,硫原子的存在使其具有较强的导电能力。因此,尖晶石型硫化物在电池及电催化等领域中显现出广阔的应用价值。但是,其在模拟酶以及分析检测领域的应用鲜有报道。本论文通过调节尖晶石型硫化物的离子组成得到不同种类的模拟酶。对不同的类酶活性及其催化机理进行研究,建立了比色/荧光检测方法,并成功用于实际样品的检测。(1)通过前驱体法制备了 NiCo2S4微米花。考察了 NiCo2S4微米花的类过氧化物酶活性及催化机理。在此基础上建立的比色传感平台对H2O2和葡萄糖具有较高的灵敏度,LOD分别为5.19μM和8.24μM,被成功用于血清样品中葡萄糖浓度的测定。此外,基于抗氧化剂对NiCo2S4类过氧化物酶活性的抑制作用,利用NiCo2S4-TMB-H2O2体系研究了单宁酸(TA)、抗坏血酸(AA)、没食子酸(GA)的抗氧化行为。三种抗氧化剂的抗氧化能力依次为:TA>AA>GA,且呈现出两类不同的抑制机理:对于AA,抑制作用是由AA与NiCo2S4之间的强电子转移引起的。对于GA和TA,抑制作用源于H2O2对抗氧化剂和TMB氧化的竞争反应。(2)通过水热法一步合成了 CuCo2S4。对其双酶活性(抗坏血酸氧化酶和过氧化物酶)进行考察,验证了 CuCo2S4可以作为串联模拟酶的可能性。基于此,建立了CuCo2S4串联模拟酶级联检测平台用于抗坏血酸的检测,并对其检测原理进行讨论。首先,基于类抗坏血酸氧化酶活性,催化AA生成脱氢抗坏血酸和H2O2;进而基于类过氧化物酶活性,催化H2O2生成·OH,·OH与底物苯甲酸反应生成能产生荧光信号的荧光产物,实现级联检测。实验结果表明,该方法的检测限低至0.11μM,实现了对AA的超灵敏检测,且能够简单、有效地检测实际样品中的AA。
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