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黄粉虫,又名面包虫,它富含大量的蛋白质、种类齐全的氨基酸,是一种优质昆虫资源。此外,黄粉虫体内还含有多种微量元素、维生素、膳食纤维、甲壳素、甲壳糖、几丁质、天然激素、多糖等。近年来随着人们对黄粉虫的深入了解,饲养黄粉虫的养殖户日渐增加,因此合理开发和充分利用黄粉虫资源变得尤为重要。本文系统研究了脱脂黄粉虫蛋白经过木瓜蛋白酶酶解,制备ACE抑制肽的工艺。这一研究为拓宽黄粉虫的应用范围,开发黄粉虫蛋白资源开辟了新途径。主要研究结果如下：第一,用单因素试验和响应面分析法优化制备ACE抑制肽工艺,最佳工艺条件为底物质量浓度为7g/100 mL,木瓜蛋白酶添加量(w/w)1%,酶解pH 6.5,酶解温度55℃,酶解时间7 h,所得酶解产物的多肽浓度为7.63 mg/mL,在此条件下对应的理论ACE抑制率为59.48%,验证得出ACE抑制率为58.86%,与理论预测值接近。在此条件制备的酶解产物的IC5o为1.77 mg/mL o第二,利用超滤和葡聚糖G-15凝胶对所得酶解产物进行分离纯化。酶解产物经超滤后得到五个组分：分子量>30 kDal, 10kDal<分子量<30 kDal, 5kDal<分子量<10kDal,3 kDal<分子量<5 kDal,分子量<3 kDal。其中分子量<3 kDal组分的ACE抑制率最高,达65.43%,IC5o为1.16 mg/mL;选用超纯水作为葡聚糖G-15凝胶层析的洗脱液,在上样浓度100 mg/mL、上样量3 mL、层析流速为0.3 mL/min条件下,得到三个峰,ACE抑制率最高的为M2组分,抑制率为72.11%,IC50为0.605 mg/mL。M2组分含量最高的氨基酸为脯氨酸(pro),其次为谷氨酸(glu)和缬氨酸(Val)。第三,考察酶解原液、超滤后各组分和层析后的组分对真菌(链格孢菌)、细菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌)的抑制作用,酶解原液和分子量大于30 kDal的组分对三种指示菌均有一定的抑制作用。其中对链格孢菌抑菌作用最强组分的分子量在10 kDal-30 kDal之间,抑菌圈直径为5.15 mm；对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌作用最强均为分子量大于30 kDal的酶解组分,其抑菌圈分别为7.37mm和7.33mm。第四,对制备出的黄粉虫ACE抑制肽进行结构鉴定和理化性质研究。研究表明,黄粉虫ACE抑制肽M2是一种混合肽,其主要组成成分的分子量为378 Dal,可能的氨基酸序列为Gly-Arg-Phe。在经过模拟人体胃肠道体外消化试验后,黄粉虫ACE抑制肽的ACE抑制率有所降低,但降低幅度较小。0.2-1 mol/L的NaCl对黄粉虫ACE抑制肽的活性几乎没有影响。在高温时(>60℃),M2的抑制活性受到较大影响。黄粉虫ACE抑制肽在中性和酸性的条件下有较好的稳定性,在碱性条件下ACE抑制率明显降低。