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骨骼主要由55%的矿物质,30%的胶原蛋白和15%的水组成。生物磷灰石是骨矿物质的重要组成部分,对骨的功能和生理机能有重要影响。生物磷灰石也是一种碳酸羟基磷灰石,CO32-可以取代PO43-,碳酸盐的含量增加,导致生物磷灰石结晶度降低;同时Na,Mg,或其他元素可替代Ca2+,导致生物磷灰石中的骨钙流失,进一步使骨的质量降低,影响骨的正常代谢。钙调节激素和性激素等多种激素共同参与调控骨代谢。为了探讨蛋鸡骨代谢变化规律及雌激素对骨钙的作用机理,本试验对蛋鸡骨代谢(包括骨化学成分)的变化规律进行了研究,同时探究了来曲唑对青年蛋鸡骨代谢的影响,以期为蛋鸡骨代谢疾病发病机理的研究提供理论依据。试验Ⅰ 不同阶段蛋鸡骨矿物质变化规律的研究本研究选取了4个年龄阶段的固始鸡,即性成熟前期(11 w)、性成熟期(18w)、产蛋高峰期(49 w)和产蛋末期(77 w)各8羽,研究其骨矿物学变化规律。固始鸡称重后,翅静脉采血5 mL后处死。取两侧肱骨、股骨和胫骨样本用于骨密度和骨强度分析,同时通过拉曼光谱分析皮质骨矿物学变化。结果显示,11～77 w,随着年龄增长骨密度增加,与11 w相比,后三个阶段蛋鸡的骨密度显著升高(P<0.05),但49 w后蛋鸡骨密度增长缓慢,相反胫骨骨密度降低。产蛋期前后,骨强度也都随年龄的增长而升高,但与性成熟阶段(18w)相比,产蛋高峰期(49w)蛋鸡肱骨、股骨和胫骨的骨强度都显著下降(P<0.05)。拉曼分析矿物变化显示蛋鸡肱骨、股骨和胫骨在产蛋期矿物质结晶度显著降低、碳酸盐含量的显著增加(P<0.05)。上述结果表明,年龄与产蛋对蛋鸡骨密度和骨强度均有显著影响。试验Ⅱ 蛋鸡骨代谢调控随年龄变化的初步研究本研究选取性成熟前期(11 w)、性成熟期(18w)、产蛋高峰期(49w)和产蛋末期(77w)的固始鸡各8羽,研究其血液生化标志物钙、磷、StrACP、ALP、BGP,骨代谢钙调节激素PTH和CT以及性激素E2水平的变化,探讨蛋鸡骨代谢的相关调控机理。结果显示,与11 w相比,18w和49w蛋鸡血钙水平显著升高;但77w血钙水平又显著低于49 w(P<0.05)。血磷水平在上述各年龄段没有呈现显著变化。与49 w之前的蛋鸡相比,77wStrACP活性显著降低;与11 w相比,18w之后蛋鸡的ALP活性和BGP水平均呈现显著下降趋势(P<0.05)。49 w时,蛋鸡骨代谢钙调节激素PTH水平显著高于11w和77w;CT水平显著高于其他三个时期(P<0.05)。与11w相比,蛋鸡性激素E2水平也发生显著变化,18 wE2浓度显著升高,在49 w时达到最高峰,77 w时又呈现显著下降(P<0.05)。结果表明:蛋鸡产蛋周期内骨代谢发生的一系列变化与钙磷代谢、钙调节激素和性激素的调控密切相关。试验Ⅲ 来曲唑对青年蛋鸡骨代谢的调控研究本试验研究了来曲唑对青年蛋鸡骨代谢的变化研究。13周龄200羽蛋鸡,将蛋鸡随机平均分为2组,即对照组和试验组,预饲1周后开始试验,试验周期为9 w。对照组每天灌服4 mL生理盐水,试验组灌服来曲唑0.5 mg/d。分别于试验的第3、6、9周,每组各8羽翅静脉采集血液样本,处死后获取骨骼样本。血液样本测定血液骨代谢标志物StrACP、ALP和骨钙素的变化,钙调节激素PTH和CT的变化以及性激素雌二醇与睾酮的变化。骨骼样本进行骨密度和骨强度测定。结果显示,来曲唑组肱骨、股骨和胫骨骨密度、骨强度都显著升高(P<0.05)。试验3 w和6 w时,来曲唑组显著降低血钙含量(P<0.05),但对血磷含量无显著影响。骨代谢标志物StrACP活性随年龄增长活性均显著增强,但来曲唑组与对照组相比无显著差异;9 w时ALP活性显著降低;同时6 w和9 w时骨钙素水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,6 w时来曲唑组骨代谢调节激素PTH水平显著降低,CT水平始终无显著变化。随年龄增长,与3w相比,6w和9wE2水平显著升高,并且试验组E2水平显著低于对照组。与对照组相比,T1有相反的变化趋势(P<0.05)。结果显示,来曲唑显著降低青年蛋鸡血浆雌激素水平,提升雄激素水平,显著降低血浆钙、StrACP水平,升高ALP和骨钙素水平,对CT水平无显著影响。具有提升骨密度和骨强度的作用。试验Ⅳ 来曲唑对青年蛋鸡钙转运影响机理的研究本试验研究了来曲唑对青年蛋鸡骨代谢过程中十二指肠和肾钙转运相关基因(CaBP-D28K、TRPV6、NCX1 和 PMCA 1b),钙调节激素相关受体(PTH1R 和 CALCR)以及性激素相关受体(ESR2和TR)基因表达的影响。同时从蛋白水平研究了十二指肠和肾脏CaBP-D28K蛋白表达的变化。结果显示,3w时,来曲唑显著下调十二指肠CaBP-D28K转录水平,上调PTH1R转录水平,对十二指肠其他基因转录无影响。同时显著上调肾脏钙调节激素和性激素相关受体基因mRNA的转录。6 w时,来曲唑显著下调十二指肠CaBP-D28K、ESR2和CALCR转录水平,上调NCX1、PMCA 1b和TR,同时显著上调肾脏CaBP-D28K、NCX1、PMCA1b和CALCR转录水平。9w时,来曲唑显著下调十二指肠CaBP-D28K、PMCA 1b、ESR2和CALCR转录水平,上调TR的转录。同时显著下调肾脏PMCA1b的转录,显著上调TRPV6和NCX1的转录,对其他基因转录水平无显著作用。蛋白表达水平上,来曲唑显著降低十二指肠CaBP-D28K蛋白表达,但对肾脏组织无显著变化。研究表明,试验后期,来曲唑从基因和蛋白水平显著降低了钙转运相关基因CaBP-D28K的表达,降低了十二指肠对钙的主动吸收。同时骨代谢受PTH1R和CALCR表达的影响,也通过ESR2和TR间接调节。