牡丹(Peaonia suffruticosa Andr.)是我国传统名花,栽培历史悠久,应用广泛。但由于花期较集中,制约了其产业化发展。所以延长牡丹花期并使其多季开放是牡丹生产、科研的主要目标之一。虽然我国的秋发牡丹品种也可在秋冬季二次开花,但开花不稳定,成花品质较差,不是真正的二次开花品种。针对上述问题,本论文选取了几个可二次开花的牡丹品种进行杂交,希望获得能够稳定二次开花的品种,以延长牡丹观赏周期。并通过对苗期杂种鉴定相关方法进行研究,得出更为快速准确的杂种鉴定方法。主要研究结果如下：经过花粉活力测定发现,常温下花粉活力持续时间较长的为‘凤丹白’、紫斑牡丹、滇牡丹、其次为日本牡丹品种,秋发牡丹品种花粉活力持续时间最短。低温能够明显延长花粉储藏时间。杂交试验共49个组合,包括革质花盘亚组内杂交,革质花盘与肉质花盘亚组间远缘杂交。共授粉511朵花,获得杂交种子1181粒,截止到2011年3月,获得杂种苗87株。革质花盘亚组内杂交获得种子504粒,出苗19株；亚组间远缘杂交获得种子677粒,出苗68株；亲和性及结实性均较好的组合为：滇牡丹天然杂种×紫斑牡丹、滇牡丹天然杂种ב莲鹤’、‘凤丹白’ב秋发1号’、和紫斑牡丹ב秋发6号’通过种子萌发试验发现,草炭层积有利于提高生根率与生根质量,400mg/LGA处理根长大于3cm的种子2h有利于出苗。将2010年杂交的478粒种子及其亲本种子带回实验室以此条件使其生根发芽,从中选取部分进行杂种鉴定。比较子代与亲本在叶片形态、气孔面积、密度,以及DNA的差异,发现真杂种在叶片形态上更接近父本,气孔介于父母本之间,但在苗期,叶片形态与气孔特征无法准确鉴定杂种真伪,RAPD分子标记可以较快速准确鉴定出杂种真伪。