与基因的稳定整合转化方法相比,植物病毒载体除了在研究植物与植物病原分子生物学、以及植物和病原相互作用中具有无可比拟的优势外,作为表达系统生产外源蛋白也具有良好的应用前景。马铃薯X病毒（potato virus X, PVX）作为表达载体具有转化途径简单、可快速得到高拷贝的外源基因等优点,因此近年来无论在基础研究还是应用研究上都得到广泛的重视。乙型肝炎是危害全球人类健康最重要的传染病之一,它是由乙肝病毒（Hepatitis B virus, HBV）侵染所引起的。由于HBV的保护性抗原表位（epitope,or antigen determinant ）主要集中于HBsAg,目前所研制的所有乙肝基因工程疫苗都由HBsAg组成。当前对清除病毒及控制乙型肝炎发生的惟一经济有效的方法就是普遍接种乙肝病毒疫苗。目前疫苗的研制是建立在大肠杆菌和酵母培养系统之上的,虽然可行,但需要发酵技术和严格的纯化程序,其庞大的设备投资和高成本的投入对发展中国家是不合适的。因而利用植物表达外源基因以生产口服乙肝疫苗成为新的选择。本研究首先以报告基因β-葡萄糖苷酸酶（β-glucuronidase, GUS）为研究对象,建立了以农杆菌转化和注射渗透法为基础的植物病毒载体介导的外源基因转化的技术体系,并对GUS基因的表达进行了检测分析,获得了侵染叶片组织为蓝色、非侵染叶片无颜色反应的定性分析结果。根据Genbank登记的乙肝病毒表面抗原小蛋白S基因HBsAg（s）序列AF223961设计引物,通过PCR扩增获得了681bpDNA片段,构建马铃薯X病毒表达载体PVXHBs,电转化农杆菌,使用注射渗透法侵染本生烟草的不同生长年龄的叶片、茎和根。在侵染后的第11天、第21天和第45天,通过ELISA检测重组HBsAg蛋白的表达水平,应用SDS-PAGE分析技术检测重组蛋白的分子量大小,以及利用Western blot分析重组蛋白的免疫原性。结果表明:（1）HBsAg含量在烟草特定发育阶段有显著不同,HBsAg蛋白在幼小叶片中的表达水平远大于已伸展的叶片,叶片中表达量也远大于茎根中含量,约相差2-60倍。HBsAg蛋白表达量会随侵染后时间发生一定的变化,但因植株而异;另外有4株烟草在侵染后的第45天提取蛋白,没有检测到阳性结果,这也验证了PVX作为一种植物病毒表达载体,类似于瞬时表达体系。活性HBsAg蛋白含量最高可达267.81ng/ml,其占可溶性蛋白（total soluble protein, TSP）含量最高可达796.81ng/mg。（2）通过SDS-PAGE分析技术检测重组HBsAg蛋白的分子量大小,约为25 kDa。（3）利用Western blot分析重组HBsAg蛋白的免疫原性,重组蛋白可与鼠抗HBsAg单克隆抗体发生特异性反应。本研究建立了马铃薯X病毒表达外源蛋白的技术体系,在本生烟（Nicotiana benthamiana）中表达乙肝病毒表面抗原（hepatitis B surface antigen, HBsAg）,为研究利用植物病毒载体简单方便、低成本的生产药用蛋白提供一条快速高效的新途径。