流动注射化学发光法在药物成分及抗氧化活性测定中的应用研究

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化学发光分析法是一种高灵敏的微量及痕量分析法,具有仪器设备简单、操作方便等显著优点,已广泛应用于药物、环境、材料等分析领域。近年来,新发光试剂的合成,新体系的开发,以及与其它技术的联用,更显示出化学发光分析法的优势,也成为国内外专家学者致力研究和探讨的热点。本论文围绕着化学发光新体系,流动注射技术,药物成分分析以及植物成分抗氧化活性的化学发光测定等方面展开研究,主要工作如下:   1.提出了Fe2+-H2O2-亚甲基蓝化学发光新体系并用于阿魏酸钠的测定。实验发现,在酸性介质中,Fe2+-H2O2体系可与亚甲基蓝反应产生极强的化学发光,阿魏酸钠对此化学发光具有显著的抑制作用。据此,结合流动注射技术,建立了一种阿魏酸钠化学发光分析的新方法。考察了影响化学发光强度的各种因素,相对发光强度与阿魏酸钠浓度0.97~9.7 mg·L-1范围内呈良好的线性关系,方法的检出限为0.16 mg·L-1。对1.0 mg·L-1的阿魏酸钠进行了11次平行测定,其相对标准偏差为0.83%。该法已成功用于片剂中阿魏酸钠含量的测定,结果与紫外分光光度法测得值无显著性差异。   2.基于在酸性介质中Fenton试剂Fe2+和H2O2在线生成的羟自由基(·OH)与亚甲基蓝反应能产生极强的化学发光,加入抗氧化剂可以清除部分·OH而使化学发光强度降低,降低程度与抗氧化剂清除羟自由基的能力有关,结合流动注射技术,建立了一种检测抗氧化剂抗氧化活性的化学发光新方法。将该方法应用于我国常见的药用和食用植物提取液抗氧化活性的研究,结果表明,中草药、茶叶和水果均表现出了良好的抗氧化性能。该体系也可用于其它抗氧化性药物的筛选。   3.研究了抗坏血酸、绿原酸、阿魏酸和丹皮酚四种植物活性成分的抗氧化活性,采用曲线拟合得到抗坏血酸、绿原酸、阿魏酸和丹皮酚的IC50(清除率为50%时溶液的浓度)分别为1.2×10-3mol·L-1、1.4×104 mol.L-1、1.3×104 mol·L-1、1.9×104 mol.L-1,四者的抗氧化活性大小关系:阿魏酸>绿原酸>丹皮酚>抗坏血酸。通过化学发光法和紫外分光光度法探讨了本体系可能的化学发光反应机理。   4.基于在酸性条件下叶酸对Ce(Ⅳ)-Na2SO3体系的化学发光反应有明显的增敏作用,建立了流动注射化学发光测定叶酸的新方法。在最佳实验条件下,相对发光强度与叶酸在5.5×10-6~2.2×104 g-L-1范围内呈良好的线性关系,方法检出限为1.7μg·L-1。对2.2×10-4 g·L-1的叶酸进行11次平行测定,其相对标准偏差为1.1%。该方法准确、灵敏、简单,应用于叶酸药片中叶酸含量的测定,结果满意。
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