水溶性高分子荧光探针的合成及其分析应用

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本文研究了荧光素在流动注射化学发光分析中的应用;含荧光素基团烯类单体的合成及其与丙烯酰胺共聚物的合成与表征;并将荧光素烯类单体与丙烯酰胺共聚物应用于流动注射化学发光分析。主要工作如下:(1)采用反相流动注射法,系统地研究了碱性介质和阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)存在下,荧光素-人绒毛膜促性腺激素(HCG)复合物的化学发光行为和化学发光条件,提出了反相流动注射化学发光法测定HCG含量的新方法。该法测定HCG的线性范围为0.8~200mIU/mL,检出限为0.01mIU/mL(3б/斜率);对浓度为10mIU/mL的HCG平行测定11次,其相对标准偏差为0.8%。将该法用于人工混合样品和孕妇尿液中HCG含量的测定,结果令人满意。(2)采用基于荧光功能单体制备荧光聚合物的方法,选择荧光素为发色团,使它与丙烯酰氯反应,合成出含有双键的荧光素单体Ac-Flu,然后令其与丙烯酰胺共聚,制备得到含有荧光素生色团的水溶性荧光聚合物poly(Ac-Flu-co-AM)。实验得到的荧光素烯类单体和聚合物采用核磁(1HNMR),红外光谱(FT-IR),差示扫描量热法(DSC),紫外-可见分光光度仪(Uv-Vis),荧光光谱等方法对其结构和性能做了表征。(3)采用反相流动注射法,系统地研究了碱性介质中和阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)存在下,poly(Ac-Flu-co-AM)-牛血清蛋白标记物的化学发光行为和化学发光条件,提出了反相流动注射化学发光法测定蛋白质含量的方法。实验对影响化学发光的可能因素和参数进行了优化,在优化的条件下,该法测定牛血清蛋白的线性范围为0.004~8μg/mL,检出限为0.04μg/mL,线性回归方程为ICL=45.10+479.80C(μg/mL),相关系数r=0.9998(N=22)。对浓度为2μg/mL的牛血清蛋白平行测定8次,其相对标准偏差为0.6%。该法应用于蕲春珍米中蛋白质含量的测定,结果令人满意,用标准加入法测定其回收率为90.0%-106.5%。实验结果表明化学发光法可应用于大米中蛋白质含量的测定。
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