棉花纤维发育相关基因的分离鉴定与功能分析

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以陆地棉(Gossypium hirsutum)6DPA棉纤维为材料,分离鉴定了棉花profilin基因家族的一个成员,将其命名为GhPFN1.利用半定量RT-PCR技术和Northern blot分析对其在棉花不同器官和纤维发育不同阶段的表达进行了分析.利用裂殖酵母这一简单模式生物对GhPFN1的细胞内功能进行了初步探讨,结果发现GhPFN1在裂殖酵母细胞中过量表达导致细胞长度和形态发生显著变化.采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法,将GhPFN1的正义和反义cDNA分别转化烟草K326悬浮细胞.对其细胞形态和细胞微丝骨架的变化进行了观察.该文第二部分以Uni-ZAP XR为载体成功建立了野生型徐州142开花前3DPA胚珠的cDNA文库,原始库的滴度为1.8×10<7>pfu/ml,插入片段的平均长度为1.0kb.共挑取12,000个克隆,并采用cDNA microarray的方法筛选纤维特异表达基因.
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