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目的:建立大鼠肝移植急性排斥反应模型,探讨供体骨髓间充质干细胞(MSCs)抑制肝移植大鼠免疫排斥的作用。方法:利用改良“二袖套法”建立大鼠原位肝移植模型,分离培养供体MSCs,并观察细胞形态学变化;实验随机分为空白对照组(A组)、FK506组(B组)和MSCs组(C组)。行大鼠原位肝移植同时,A组同期输注生理盐水,B组术后隔天一次给予FK506(0.25mg/kg)灌胃2周,C组同期输注与A组同剂量的供体MSCs给受体。观察手术操作时间及手术成功率及术后第10天肝功能的变化、病理改变、免疫组化TGF-β1与IL-10的表达、Y染色体定位及受体生存期。结果:大鼠原位肝移植模型制作,供体手术时间为(23±3)min ,受体手术时间为(45±5) min ,无肝期为(17±2) min,手术成功率为95.2%。MSCs细胞培养显示,原代培养细胞呈现杂质相对较多,融合性差,第3代培养细胞杂质少,增值速度快,融合性强。术后第10天肝功能,C组受体大鼠的ALT和AST分别为103.16±31.03U/L及149.67±37.80U/L,较A组756.33±103.91U/L及635.00±134.43U/L显著降低﹝P<0.01﹞,且C组低于B组;病理变化,A组为重度排斥,B、C两组排斥反应较A组显著减轻,且C组较B组病理反应级别更低;免疫组化检测TGF-β1及IL-10,B、C两组显示强阳性表达且C组比B组更明显,而A组则为弱阳性表达;SRY原位分子杂交检测显示C组出现含Y染色体的雄性阳性细胞(即MSCs),以汇管区聚集为多;C组中位生存时间(MST)超过63天,较A组11天显著性延长,且C组明显长于B组。结论:(1)利用改良的Kamada二袖套法,成功建立稳定的大鼠原位肝移植模型(2)第3代MSCs更适合于细胞移植。(3)肝移植同时输注供体骨髓间充质干细胞能够抑制受体对移植肝的免疫排斥,诱导大鼠肝移植术后长期存活。