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左旋肉碱(L-肉碱)是一种非常重要的“条件营养素”,对于奶粉行业,尤其是是婴幼儿乳粉行业来说,L-肉碱主要起到营养保健的作用。母乳中L-肉碱含量较高,婴儿自身不能合成肉碱,主要靠母乳供给。但随着社会的发展,许多母亲由于工作等原因不能母乳哺喂婴儿,往往选用市售奶粉喂养婴儿。所以左旋肉碱作为营养添加剂添加到婴儿乳粉中。左旋肉碱作为营养标签中标示的一种营养成分,其含量必须经过检测。而婴幼儿乳粉中的L-肉碱有游离型和结合型两种存在形式,结合态约占总肉碱含量的30%,并且其生理作用与游离态等同。因此,建立婴幼儿乳粉中的游离肉碱及总肉碱含量的检测方法对监测其含量意义重大。本文经研究,建立了亲水作用超高效液相色谱-串联质谱测定婴幼儿乳粉中左旋肉碱含量的方法。实验结果如下:(1)建立了婴幼儿乳粉中游离L-肉碱含量的亲水作用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法。样品经超纯水溶解定容,其稀释液用乙腈沉淀蛋白,经0.22μm滤膜过滤后,采用WatersAcquity UPLC BEH HILIC色谱柱(1.7μm,2.1mm×50mm),柱温为25℃,流速为0.3 mL/min,进样量为5μL,检测周期6min,梯度洗脱条件进行分离后,采用保留时间和多反应离子监测(MRM)定性、定量,同位素内标校正。结果表明,游离L-肉碱在3.75~90.0ng/mL范围内具有良好的线性关系,相关系数平方值(R2)为0.9997;样品的加标回收率在97.35%~100.07%之间,相对标准偏差(RSD)在0.20%~0.57%之间;检测限(LOD)为0.023 mg/100g,定量限(LOQ)为0.075 mg/100g。(2)建立了婴幼儿乳粉中总肉碱含量的亲水作用UPLC-MS/MS分析方法。样品用40mL超纯水溶解后,加入6mL的2mol/L KOH,置于100°C中水解1.5小时,用超纯水定容,其稀释液用乙腈沉淀蛋白,经0.22μm滤膜过滤后用UPLC-MS/MS进行分析,UPLC-MS/MS条件同上。结果表明,总L-肉碱在3.75~90.0ng/mL范围内具有良好的线性关系,R2为0.9997;样品的加标回收率在97.35%~101.76%之间,RSD在0.09%~0.77%之间;LOD为0.023 mg/100g,LOQ为0.075mg/100g。