人羊膜匀浆提取液对大鼠碱烧伤后角膜超微结构的影响

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目的:观察人羊膜匀浆提取液对大鼠角膜碱烧伤后角膜超微结构的影响,探讨羊膜匀浆提取液应用于角膜碱烧伤后的临床价值及作用机理。方法:健康无眼疾的SD大鼠40只(40眼)随机分为实验组和对照组,每组20只(20只眼)。相同条件下,所有大鼠使用lmol/L的NaOH溶液建立右眼角膜碱烧伤模型。损伤后实验组立即行人羊膜匀浆提取液点眼,每日四次,对照组用PBS液点眼,每日四次。碱烧伤后每日在裂隙灯显微镜下观察大鼠眼表的总体情况,例如眼结膜充血,角膜透明性,以及新生血管生长情况。进行眼前节照相,通过图像分析系统记录两组大鼠角膜上皮愈合,以及角膜新生血管生长情况。隔日行共聚焦显微镜动态观察大鼠角膜超微结构的变化,分析角膜中炎症细胞、成纤维细胞以及内皮细胞的数量及形态改变。于烧伤后3d、7d、14d、28d每组随机处死3只试验大鼠,取大鼠眼球进行HE染色,行组织学染色观察角膜各层超微结构的变化。结果:碱烧伤后第1d至第7d,实验组角膜上皮愈合明显快于对照组(P<0.01)。实验组角膜新生血管出现平均时间为(4.8±0.6)d,晚于对照组(3.1±0.5)d,(P<0.01),对照组最大新生血管面积为(48.72±2.12)mm2,实验组为(35.12±1.77)mm2,各个时间点两组之间角膜新生血管面积的差异均有统计学意义(各p<0.01)。碱烧伤后9d,对照组炎症细胞数量最多为(3164±306)个/mm2,实验组为(2830±254)个/mm2,两者之间差异有统计学意义(P<0.01);碱烧伤后11d,对照组成纤维细胞数量为(349±105)个/mm2,实验组为(248±84)个/mm2,两者之间差异有统计学意义(P<0.01);碱烧伤后28d,对照组内皮细胞计数为(1837±59)个/mm2,对照组内皮细胞计数为(2063±54)个/mm2,两者之间差异有统计学意义(P<0.01)。HE染色提示实验组炎症细胞、成纤维细胞、角膜新生血管数量较少,基质层纤维结构排列较为规则。结论:新鲜人羊膜匀浆提取液可以有效促进大鼠碱烧伤后角膜上皮细胞的增殖,抑制炎症细胞浸润,减少角膜新生血管的形成,抑制成纤维细胞的激活和增殖,减少角膜瘢痕的形成,有利于碱烧伤后大鼠角膜的透明愈合。
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