背景:牙周炎是一类以菌斑为主的多因素疾患,炎症范围主要波及牙周软硬组织,牙齿受到这种长期的、持久的损伤会引起牙周组织的炎症和破坏,最终导致牙齿松动和脱落。临床上采用的牙周治疗也只能延缓或阻止病情的进一步发展,无法真正使缺损的牙周组织恢复再生。目前的研究表明,干细胞外泌体具有干细胞的分化潜能,又能有效地规避干细胞治疗的问题,为再生医学提供了新的思路和方案,其中脂肪干细胞取材方便、含量丰富、良好的生物相容性等优点使其成为外泌体良好的供体细胞,目前脂肪干细胞外泌体在抑制炎症、修复骨缺损和促进骨再生方面具有显著的作用,但其作用于治疗牙周炎的作用仍有待研究。目的:本研究拟通过体内实验探讨局部注射脂肪干细胞来源的外泌体在治疗牙周炎中的成效性,为牙周炎的治疗提供新的思考。方法:1、从大鼠两侧腹股沟的脂肪中分离出脂肪干细胞,取第三代细胞用于后续实验,成骨诱导后进行茜素红染色;成脂诱导后进行油红染色。采用超滤离心技术提取脂肪干细胞外泌体,电镜观察、粒径分析、蛋白免疫印迹（Western-Blot,W B）检测外泌体表面标记物。2、构建大鼠牙周炎模型,大鼠腹腔麻醉后,将双侧上颌第一磨牙进行结扎,连续结扎8周。大体观察牙周组织的炎症表现,同时检测大鼠牙周炎临床指标包括菌斑指数、龈沟出血指数、探诊深度;HE染色观察结合上皮位置、炎症细胞浸润、牙槽嵴高度等,以此验证大鼠牙周炎模型是否构建成功。3、8周建模成功后,将40只SD大鼠按随机性原则,分为4组:正常组（N组）、牙周炎组（P组）、牙周炎+脂肪干细胞外泌体注射组（ADSC-Exos组）、牙周炎+PBS注射组（PBS组）。各组按实验规划进行治疗干预,连续治疗四周,检测PLI、SBI、PD等牙周临床指标,通过苏木精伊红（Hematoxylin-eosin,HE）染色观察各组牙周炎的病理表现并测量牙槽骨吸收量（Alveolar bone loss,ABL）,影像学分析各组牙槽骨吸收情况,酶联免疫吸附试验（Enzymelinked immuno sorbent assay,ELISA）检测分析各组大鼠血清中炎性因子白介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达量,实时定量聚合酶链式反应（real-time quantit ative PCR,q RT-PCR）检测各组牙龈组织炎性因子表达水平。结果:1、通过分离大鼠双侧腹股沟脂肪组织提取的ADSCs光镜观察显示ADSCs原代细胞是贴壁细胞,形态为长梭形,密集生长可呈旋涡状。茜素红染色后可见明显的钙结节,油红染色可见脂滴的形成。脂肪干细胞外泌体电镜观察呈茶托样结构,直径在30-200nm之间,可高表达外泌体表面标记物CD63。2、使用正畸结扎丝成功构建大鼠牙周牙周炎模型,每周体重检测发现大鼠食欲有所减退,体重增长速度减缓,结扎丝位置合适无松动。结扎八周后观察发现大鼠牙周组织炎症明显,菌斑堆积,探诊出血,形成深牙周袋,牙齿松动度增加,HE染色病理切片镜下可见第一磨牙出现炎症细胞浸润,结合上皮向根方延伸,牙槽骨嵴顶吸收,出现破骨细胞,上述证明了大鼠牙周炎建模成功。3、注射ADSC-Exos治疗后,牙周临床指标显著下降,HE染色组织学切片也可见ADSC-Exos组出现明显的骨再生,结合上皮轻度向根方增殖,炎性细胞浸润程度减轻,P组与PBS组出现深牙周袋、炎症细胞浸润、牙槽骨吸收明显,结合上皮根方延伸明显,N组无明显的炎性表现。影像学结果与组织学分析结果相一致。4、ELISA法分析显示,ADSC-Exos组血清中IL-1β、TNF-α含量均明显低于P组和PBS组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。q RT-PCR显示,与N组相比,P组大鼠牙龈组织内各炎性因子（IL-1β、TNF-α）m RNA水平显著上调,而ADSC-Exos组大鼠牙龈组织炎症因子m RNA水平显著低于P组,差异有统计学意义。结论:1、使用正畸结扎丝可以有效构建大鼠牙周炎模型2、将脂肪干细胞外泌体局部注射至大鼠牙周袋内可以有效减轻局部的炎症反应,一定程度上抑制牙槽骨吸收,促进牙周区域的骨再生,为临床的治疗运用提供了新的思路和方式。