本试验以BMP15和GDF9为研究材料，绵羊卵丘细胞为研究对象，探究BMP15和GDF9对卵丘细胞扩展相关基因、激素受体表达量以及激素分泌的作用，并通过流式细胞仪分析BMP15和GDF9协同效应对绵羊卵丘细胞凋亡影响，为BMP15和GDF9在体外培养绵羊卵母细胞提供参考。
　　一、BMP15和GDF9对绵羊卵丘细胞激素受体及扩展相关基因表达的影响
　　利用荧光定量PCR分别对添加0、25、50、100、200ng/mLBMP15以及50、100、200、400ng/mLGDF9培养卵丘细胞中E2R、PTX3、FSHR、LHR、HAS2、PTGS2mRNA相对表达量进行检测。结果显示：添加100ng/mLBMP15时，HAS2、PTGS2、PTX3与FSHRmRNA相对表达量极显著高于对照组及其它浓度处理组(P＜0.01)，LHR、E2RmRNA相对表达量显著高于对照组及其他浓度处理组(P＜0.05)。添加50ng/mLBMP15时HAS2mRNA相对表达量显著高于对照组(P＜0.05)；添加100ng/mLBMP15时PTX3mRNA相对表达量与50ng/mL浓度处理组差异不显著；添加100ng/mLBMP15时E2RmRNA相对表达量显著高于对照组、50、200ng/mL处理组(P＜0.05)，极显著高于25ng/mL处理组(P＜0.01)。添加200ng/mLGDF9时，HAS2、PTX3、FSHR与E2R、LHRmRNA相对表达量极显著高于对照组与其他浓度处理组(P＜0.01)，PTGS2mRNA相对表达量极显著高于对照组与50、400ng/mL浓度处理组(P＜0.01)，与100ng/mL浓度处理组差异显著(P＜0.05)，当GDF9添加浓度增加至400ng/mL时，各基因mRNA相对表达量均明显下降并且极显著低于200ng/mL浓度处理组。
　　二、不同浓度BMP15和GDF9对绵羊卵丘细胞中雌激素与孕酮分泌的影响
　　以0ng/mL为空白对照组，添加100、200ng/mLBMP15时细胞培养液中E2分泌量极显著高于对照组(P＜0.01)，显著高于25、50ng/mL浓度BMP15处理组(P＜0.05)，而100ng/mL与200ng/mL浓度之间对绵羊卵丘细胞E2分泌量没有显著差异(P＞0.05)；添加200ng/mL浓度BMP15时，卵丘细胞分泌P4与对照组差异显著(P＜0.05)，各处理组之间差异不显著(P＞0.05)；添加400ng/mL浓度GDF9时，E2分泌量极显著高于空白对照组与50ng/mL浓度处理组(P＜0.01)，200ng/mL浓度处理组E2分泌显著高于对照组、50与100ng/mL浓度处理组(P＜0.05)，200与400ng/mL浓度处理组之间无显著差异(P＞0.05)；50ng/mL浓度添加量与对照组之间P4分泌没有显著差异，100、200、400ng/mL浓度处理组P4分泌量显著高于对照组(P＜0.05)，并与50ng/mL浓度处理组之间无显著差异(P＞0.05)，而100、200、400ng/mL三种浓度处理组之间无显著性差异(P＞0.05)。
　　三、BMP15和GDF9对绵羊卵丘细胞凋亡的影响
　　利用流式细胞术检测添加BMP15、GDF9对绵羊卵丘细胞凋亡水平的影响，探索BMP15与GDF9协同效应。结果表明：分别添加100ng/mLBMP15和200ng/mLGDF9时，细胞凋亡率显著低于未添加组(P＜0.05)，50ng/mLBMP15与100ng/mLGDF9混合添加处理组细胞凋亡率极显著低于未添加组(P＜0.01)。
　　综上，在体外培养绵羊卵丘细胞培养液中添加100ng/mLBMP15与200ng/mLGDF9能够促进绵羊卵丘细胞PTX3、FSHR、LHR、E2R、HAS2、PTGS2mRNA相对表达量，增加卵丘细胞E2、P4激素分泌量，且BMP15与GDF9在绵羊卵丘细胞抗凋亡作用中具有协同效应。