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小球藻(Chlorella)是一类普生性单细胞绿藻，营养丰富，具有非常多的活性成分，具有显著的药理和营养保健作用，是很好的保健食品及药品来源，极具广阔的开发前景。本文通过响应面优化了小球藻蛋白质的提取工艺，并通过酶法制备小球藻抗肿瘤多肽，同时采用微囊技术达到抗肿瘤多肽活性保护及缓释的目的，为小球藻多肽作为抗肿瘤药物的开发提供了理论依据。研究结果如下：(1)采用低温超高压连续流细胞破碎机对小球藻蛋白质进行提取，考察液料比、压力、循环次数对小球藻蛋白质的提取率的影响。通过响应面设计确定最佳工艺参数为：液料比21:1，压力170MPa，循环次数4，在此优化工艺条件下，实际测得的小球藻蛋白质提取率为45.78%。(2)选择木瓜蛋白酶、胰蛋白酶及Alcalase2.4L三种蛋白酶分别对小球藻蛋白质进行酶解，在考察水解液pH值、酶与底物浓度比、水解温度和水解时间对水解反应的影响的基础上，采用正交试验设计对酶解条件进行了优化分析。木瓜蛋白酶的最优酶解条件为：酶与底物浓度比(E/S)为2%，温度为70℃，pH为6.0，反应时间为4h，该条件下水解度为14.33%；胰蛋白酶的最优酶解条件为：酶与底物浓度比(E/S)为4%，温度47°C，pH7.0，反应时间为6h，该条件下水解度为8.47%； Alcalase2.4L的最优酶解条件为：酶与底物浓度比(E/S)为2%，温度50°C，pH8.0，反应时间为10h，该条件下水解度为18.31%。(3)根据酶解条件优化结果，各酶种分别在最优条件下对小球藻蛋白质进行酶解，各酶解液及小球藻蛋白质原液经超滤，共得到十二种产物，评价各产物抑制肝癌细胞HepG2的能力，结果表明木瓜蛋白酶酶解液3KD-5KD对HepG2细胞的抑制能力最强。通过离子交换色谱和凝胶过滤色谱两种分离技术，分别对小球藻木瓜蛋白酶酶解液3KD-5KD进行逐级分离，评价了各级分离产物抑制肝癌细胞HepG2的能力，并最终得到了小球藻多肽。(4)MTT结果显示，小球藻多肽和氟尿嘧啶对肝癌细胞HepG2表现出抑制作用，存活率随药物浓度的增加而增大，呈明显的量效关系；其IC50值分别为426μg/mL和314μg/mL。小球藻多肽浓度梯度(0.1-0.5mg/mL)处理HepG2细胞，倒置显微镜分析结果显示了典型的凋亡特征。(5)得到的小球藻抗肿瘤肽，用微囊化的方法对其活性进行保护。通过复凝聚法和离子凝胶法两种工艺制备小球藻抗肿瘤多肽微囊，其包埋率分别为74.5%、30.1%；载药率分别为12.7%、12.3%。两种微囊在胃液中的释放率均较低，在肠液中可继续释放，达到了缓释的目的。包埋后的微囊抗肿瘤活性与未包埋时活性相比，损失不是很大，说明微囊化适合作为小球藻抗肿瘤多肽保护的方法。