【摘 要】
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目的 运用单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶基因(herpes simplex virus thymidine kinase gene,HSV-TK)与核苷类似物GCV所组成的自杀基因系统(suicidegene therapy system)在体外治
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目的 运用单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶基因(herpes simplex virus thymidine kinase gene,HSV-TK)与核苷类似物GCV所组成的自杀基因系统(suicidegene therapy system)在体外治疗人胰腺癌细胞SW1990,研究该系统对肿瘤细胞的抑制及杀伤作用,同时观察旁观者效应,以期为临床治疗胰腺癌提供理论基础和实验依据.方法我们通过脂质体介导的基因转移方法将含有HSV-TK基因的复制缺陷型逆转录病毒载体GINaTK导入空载的包装细胞PA317,建立包装细胞系PA317/TK,然后利用该包装细胞产生的假病毒颗粒感染人胰腺癌细胞SW1990,得到转基因的SW1990/TK细胞.在SW1990/TK细胞培养物中加入抗病毒前体药物GCV,观察HSV-TK/GCV自杀基因系统对人胰腺癌细胞生存率的影响.将SW1990和SW1990/TK细胞以不同的比例混合培养,加入GCV后观察旁观者效应.结果 我们成功构建了包装细胞PA317/TK并通过其产生的假病毒颗粒感染靶细胞得到SW1990/TK.实验结果表明经过转导HSV-TK基因的胰腺癌细胞SW1990/TK对GCV较未经转导的SW1990细胞敏感,表现出显著的生长抑制及杀伤作用(P<0.0025).此外,将基因转导前后的两种细胞混合培养,在加入GCV后观察到了强烈的旁观者效应.结论 HSV-TK/GCV自杀基因系统对人胰腺癌细胞有显著的生长抑制及杀伤作用,并且通过旁观者效应加强了这种作用.我们的实验结果为胰腺癌的治疗提供了一定的理论依据和实验基础.
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