禾谷镰刀菌磷酸酶组功能研究

被引量 : 0次 | 上传用户:dhgczjd
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
由激酶和磷酸酶分别催化的磷酸化和去磷酸化修饰在细胞中许多生命现象中包括细胞周期、转录和翻译、以及生理代谢等过程中发挥重要作用。在一个真核生物的基因组中,大约0.6%基因的编码产物是蛋白质磷酸酶,但人们对植物病原真菌中的磷酸酶尚缺乏系统研究。通过生物信息学分析,我们在禾谷镰刀菌的基因组中发现82个可能编码磷酸酶的基因,本文对这82个基因进行了系统研究,取得如下研究进展:(1)基因敲除试验中,我们成功获得了71个基因缺失突变体,对这些突变体进行了15种表型分析,涵盖菌体生长、对不同营养成分的响应及致病性等方面;未能获得其余11个基因敲除突变体,表明它们可能是禾谷镰刀菌的持家基因。(2)磷酸酶Fg09532的基因缺失突变体(△Fg09532)在基础培养基MM(minimal media)培养基上不能生长,但是可以在营养丰富的PDA (potato dextrose agar)培养基上生长,实验发现甲硫氨酸的添加使△Fg09532在MM培养基上恢复生长,而其它氨基酸的添加不能恢复△Fg09532在MM上的生长缺陷,说明磷酸酶Fg09532参与到禾谷镰刀菌中甲硫氨酸合成途径的调控。(3)4个磷酸酶基因(Fg06297, Fg03333, Fg03826和Fg07932)的缺失不会导致菌体明显的生长缺陷,但是这4个突变体在麦穗上的致病力显著降低,其中Fg03333和Fg03826是盘菌亚门Pezizomycotina病原真菌的特有基因。(4)磷酸酶Fg10516的基因缺失体(△Fg10516)在麦穗上完全丧失致病性,扫描电镜观察发现接种7天后野生菌株可以在麦穗表面形成很多侵入结构,而AFg10516的菌丝在麦穗表面无法形成类似的侵入结构。(5)通过Western blot实验,我们发现磷酸酶Fg10516,Fg03333和Fg12867是禾谷镰刀菌MAPKs信号途径(Slt2-MAPK、FgGmpk1-MAPK和Hog1-MAPK)的负调控元件。(6) Slt2-MAPK途径中激酶FgMkk1通过正向调控Slt2和Hogl的磷酸化而在病菌生长、胁迫响应和致病过程中发挥重要作用。(7)酪氨酸磷酸酶FgCdc14可以部分回补酿酒酵母中同源基因ScCDC14温度敏感型突变体在高温下的生长缺陷。FgCdc14除了参与调控禾谷镰刀菌生长发育、DON毒素合成和致病性之外,还影响核糖体的合成。在FgCDC14突变体中68个编码核糖体蛋白基因的表达显著升高,并且突变体细胞中核糖体的数目明显降低。通过亲和捕获和酵母双杂实验,我们发现FgCdc14一个新互作蛋白FgTfc7,该蛋白参与RNA聚合酶Ⅲ转录5S rRNA的过程;FgTfc7和FgCdcl4都定位在细胞核中,而FgTFC7的基因沉默也导致细胞内核糖体数目下降。本文研究结果表明,磷酸酶在禾谷镰刀菌生长发育、环境适应性和致病性的调控中起到重要的作用。
其他文献
目的:考察铁皮石斛改善记忆功能及整体衰老状态的作用.方法:给药10周后,通过迷宫实验及跳台实验,观察铁皮石斛榨汁液(体积分数为1 g·kg-1)、多糖(体积分数为0.32 g·kg-1)对
禅宗美学是一种宗教美学,是禅宗在发展过程中逐步形成的审美思想。禅宗美学是以受禅宗思想影响的禅师、文人、士大夫等人的审美创作为主要表现方式,长期以来,禅宗美学都与园
采用热解塞曼原子吸收光谱法和微波消解原子荧光光谱法,测定土壤和沉积物中的总汞,两种方法均有较好的检出限、准确度和精密度。经t检验,两种方法不存在显著性差异。微波消解
青脚麻鸡在本区域养殖量日益增加。在饲养过程中,较易发生肠毒综合征,主要是由于球虫、魏氏梭菌、大肠杆菌等肠道细菌以及呼肠孤病毒、轮状病毒等病毒的混合感染导致发病,发
“由于B股市场已经完成了其历史使命,因此本着对B股公司及投资者负责的精神,B股市场应尽快予以关闭,并给B股公司一个明确的出路。”
研究目的腰椎间盘突出症(Lumbar Disc Herniation,LDH)的主要症状表现为腰部及下肢神经痛,严重者不能坐立、行走,影响正常的工作和学习。而针刀疗法治疗LDH疗效显著,在临床上
维生素是人体所需要的7大类营养素中最容易缺乏的一类,运动人群叉属于维生素缺乏症的高发人群;而维生素缺乏不仅可导致运动能力下降;还会进一步影响健康水平。文章就此问题研究
中国面点历史悠久,品种繁多。它产生于民间,被各族人民所喜爱。它蕴涵着民族浓郁的乡土韵味,为百姓的生活增光添彩,并以其悠久的历史和地方特色在祖国饮食的百花园里散发着别
目的研究临床护理路径在眼科白内障患者护理中的应用价值体会。方法选取我院眼科白内障患者110例,按照入院顺序奇偶数随机分为实验组和常规组各55例,常规组采用日常常规性护
术前访视是围手术期护理的重要环节,是患者获得高质量护理及顺利康复的关键[1]。随着医学科学的发展,以射频消融(radio frequency ablation,RFA)及微波消融为代表的局部消融手术在肝