蒙药蓝盆花化学成分及质量控制的研究

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目的研究蒙药蓝盆花的化学成分,对分离得到的单体化合物进行体外细胞毒活性筛选,并建立蒙药蓝盆花的含量测定方法,为阐明该药材的药效物质基础奠定基础,为其质量控制及深层次开发利用提供科学依据。方法采用系统溶剂法进行提取和萃取分部,利用溶剂法和多种现代色谱技术(硅胶、Sephadex LH-20、RP-18、MCI、HP-20大孔吸附树脂等柱色谱)对蒙药蓝盆花的各提取部位进行系统分离,利用理化鉴别及现代波谱分析技术(MS、1H-NMR、13C-NMR、DEPT以及1H-1H COSY、HSQC、HMBC等2D NMR)鉴定化合物的结构。利用MTT法对分离得到的单体化合物进行体外细胞毒活性研究。通过紫外分光光度法,以芦丁为对照品,对蒙药蓝盆花中的总黄酮进行含量测定;应用反相高效液相色谱法,同时测定蒙药蓝盆花中木犀草素和芹菜素的含量。结果从蒙药蓝盆花中共分离鉴定了16个化合物,分别是齐墩果酸(1),芹菜素(2),木犀草素(3),胡萝卜苷(4),山奈酚-3-O-β-D-6-O-(对羟基桂皮酰基)-吡喃葡萄糖苷(5),山柰酚-3-O-β-D-[3,6-二-(对羟基桂皮酰)-吡喃葡萄糖苷(6),芹菜素-7-O-葡萄糖苷(7),木犀草素-4’-O-葡萄糖苷(8),芹菜素-7-O-芦丁糖苷(9),咖啡酸甲酯(10),马钱素(11),腺苷(12),木犀草素-6-C-葡萄糖苷(13),华北蓝盆花素(14), Sylvestrosides Ⅰ(15),Sylvestrosides Ⅱ(16)。单体化合物的体外细胞毒活性筛选结果表明,从蒙药蓝盆花中分离得到的所有单体化合物对狗肾细胞MDCK均具有明显的细胞毒作用,大部分化合物对人慢性髓性白血病细胞K562、小鼠淋巴瘤细胞YAC-1具有抑制作用,对人肝癌细胞SMMC-7721具有很强的抑制作用。含量测定方法学研究表明,蒙药蓝盆花中总黄酮以芦丁为对照品,在16.448~57.568μg·mL-1范围内呈良好线性关系,加样回收率为99.01%,RSD=1.97%;木犀草素在7.14×10-3~42.84×10-3mg·mL-1范围内线性关系良好,平均回收率为103.61%,RSD为0.86%;芹菜素在7.13×10-3~42.75×10-3mg·mL-1范围内呈良好线性关系,平均回收率为98.82%,RSD为0.72%。结论化合物14为新化合物,14个化合物(1、36、816)为首次从该种植物中分离得到,12个化合物(36、810、1216)为首次从该属植物中分离得到;大部分化合物具有不同程度的细胞毒活性。所建立的药材中总黄酮的含量测定方法及药材中木犀草素和芹菜素的含量测定方法,均简便、准确、灵敏度高、重现性好,可作为该药材的含量测定方法。
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