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目的：检测MDM2(murine double minute2,鼠双微粒体2)在不同乳腺癌细胞株中的表达情况,并探讨MDM2在乳腺癌细胞EMT(epithelial-mesenchymal transition,上皮间质转化)中的作用及其分子机制。方法：培养MCF-7细胞、MDA-MB-231细胞和MDA-MB-435细胞,应用Westernblot检测三种乳腺癌细胞中MDM2以及EMT相关标记分子的蛋白表达情况；然后,在MCF-7和MDA-MB-231细胞中分别瞬时转染MDM2表达质粒和RNAi质粒,应用Western blot和细胞免疫荧光检测MDM2以及EMT相关标记分子的蛋白表达变化；接下来,在MCF-7和MDA-MB-231细胞中均瞬时转染MDM2的过表达质粒,应用Western blot和定量PCR分别从蛋白水平和mRNA水平检测促进EMT发生的转录因子Snaill、Twist的表达。另外,我们构建了表达MDM2的慢病毒,筛选得到MDM2稳定转染细胞株及对照细胞,从蛋白和mRNA水平检测了稳转细胞中上皮标记分子E-cadherin、转录因子Snaill和Twist的表达。结果：1、上皮标记分子在MCF-7细胞中表达较高,而间质标记分子在MDA-MB-231、MDA-MB-435细胞中表达较高；MDM2在MDA-MB-435细胞中表达最高,在MDA-MB-231细胞中最低。2、MCF-7细胞瞬时转染pcmv-MDM2质粒后,上皮标记分子表达下调,细胞形态由鹅卵石形变为纺锤形,MDM2促进了EMT的发生。3、MDA-MB-231细胞瞬时转染干扰质粒si-MDM2-5后,间质标记分子表达下调,细胞形态由长梭形变为卵圆形,反方向验证了MDM2在EMT中的作用。4、MCF-7和MDA-MB-231细胞瞬时转染pcmv-MDM2表达质粒后,促进EMT发生的转录因子Snail、Twist蛋白水平和mRNA水平在两种细胞中均较空白对照组上调。5、MDM2稳定转染细胞株(MCF-7/MDM2-a) MDM2表达上调,细胞形态由鹅卵石形变为纺锤形,而且上皮标记分子E-cadherin表达下调,转录因子Snail、Twist表达上调。结论：在乳腺癌细胞中MDM2过表达引起转录因子Snaill、Twist表达上调,进而促进EMT的发生。